水茄果实中的一个新木脂素苷(1)
[摘要]应用柱色谱及高效液相色谱分离技术对茄科茄属植物水茄Solanum torvum果实进行化学成分研究，从中分离得到6个化合物。通过波谱分析技术分别鉴定为2， 3-(trans)-dihydro-2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-[(β-D-glucopyranosyloxy)methyl]-7-methoxybenzofuran-5-propenoic acid(1)，torvoside A(2)，torvoside C(3)，torvoside H(4)，solanolactoside A(5)，(25S)-6α-hydroxy-5α-spirostan-3-one-6-O-[α-L-rhamnopyranosyl-(1→3)-β-D-quinovopyranoside](6)。其中化合物1为新的木脂素苷类成分。
[关键词]茄科； 茄属； 水茄； 木脂素苷； 甾体皂苷
茄科Solanaceae茄属Solanum植物多为草本，亚灌木，灌木至小乔木，亦有藤本，全世界共计约2 000种，我国有39种，分布广泛。水茄Solanum torvum又名金纽扣，天茄子，洋毛辣等，分布于我国两广，云南，台湾，其根茎入药，具有活血消肿止痛的功效，用于胃痛，痧症，闭经，跌打损伤等[1]。水茄的化学成分研究显示水茄中含有多种甾体类皂苷成分[2-3]，其中部分单体显示出一定的细胞毒作用[3]。本课题组对水茄果实中的甾体皂苷类化学成分进行分离，共获得1个新的木脂素苷类化合物(1)及5个已知的甾体皂苷化合物(2～6)。化合物1(图1)与已知化合物aegineoside有着相同的苯并呋喃类木脂素苷元，不同处在于糖链接位置由4位变成9位。
, 百拇医药
1材料
Brucker AM 400 型核磁共振仪；Nicolet-Magna-750 FTIR 光谱仪；Perkin-Elmer 341 型旋光仪； Finnigan LCQ Deca XP 电喷雾质谱，Waters Micromass Q-TOF ultima Globe电喷雾质谱；Agilent 1200型高效液相色谱仪；Agilent Eclipse XDB-C18(9.4 mm×250 mm，5 μm) 色谱柱；TLC板 HF254(烟台汇友硅胶有限公司)；柱色谱用硅胶200～300，300～400目，色谱硅胶(青岛海洋化学工厂用品)，GE 公司Sephadex LH-20；Fuji公司ODS柱色谱反相硅胶，三菱化学MCI GEL填料。试剂由国药集团化学试剂有限公司生产，均为分析纯。
药材采自广西，经上海中医药大学赵志礼教授鉴定为水茄S. torvum。
2提取与分离
, 百拇医药
干燥水茄果实5 kg粉碎至颗粒状，以95%乙醇浸没回流提取2 h，重复3次。剩余药材以50%乙醇浸没回流提取2 h。合并50%乙醇部分滤液，减压浓缩至无醇味后，过大孔树脂柱，依次以水，20%，40%，60%乙醇洗脱。大孔树脂60%乙醇组分再使用20%，40%，60%，80%甲醇过MCI柱色谱梯度洗脱。80%甲醇洗脱部分以硅胶柱色谱分离，依次以20∶1，15∶1，10∶1，8∶1，6∶1，4∶1乙酸乙酯-甲醇系统梯度洗脱，得到6个组分。其中，组分3以Sephadex LH-20(80%甲醇)洗脱，并通过半制备HPLC用30%乙腈制备获得化合物1(12 mg，tR=7.52 min)；组分4以Sephadex LH-20(80%甲醇)洗脱，并通过半制备HPLC用34%乙腈制备获得化合物3(13 mg， tR=7.84 min)，5(23 mg， tR=8.22 min)；组分5以ODS(40%乙腈)洗脱，并通过半制备HPLC用60%甲醇制备获得化合物4(3 mg， tR=8.01 min)；组分6以Sephadex LH-20 (60%甲醇)洗脱，并通过半制备HPLC用52%乙腈制备获得化合物2(15 mg， tR=7.34 min)，6(20 mg， tR=10.81 min)。
, 百拇医药
3结构鉴定
化合物1为淡黄色固体，HR-ESI-MS m/z 557.163 3 [M+Na]+(计算值557.163 5)，提示其分子式为C26H30O12。红外数据显示分子结构中含共轭羰基结构(1 639 cm-1)，苯环(1 519，1 498 cm-1)以及C-O振动(1 213，1 146 cm-1)。氢谱数据中δH 6.97(1H，br s，H-2)，6.75(1H，d，J=8.3 Hz，H-5)，6.78(1H，d，J=8.3 Hz，H-6)，3个质子的偶合常数及裂分提示其为AMX型三取代苯环上质子；7.05(1H，s，H-2′)，7.24(1H，s，H-6′)为AM型四取代苯环上2个氢信号；δH 6.34(1H，d，J=15.9 Hz，H-8′)，7.29(1H，d，J=15.9 Hz，H-7′)为反式双键质子信号；δH 3.74(3H，s)； 3.79(3H，s)为甲氧基质子信号；δH 4.24(1H，d，J=7.7 Hz)为葡萄糖的端基质子信号。碳谱及DEPT-135中显示化合物1含有26个碳原子，其中包括14个芳香碳原子信号或双键碳原子信号，1个羧基碳原子信号以及6个糖上碳原子信号，2个甲氧基信号，2个CH(其中1个与氧原子相连δC 87.8)，以及1个CH2信号。除掉2个甲氧基和糖信号，剩余18个碳原子，再结合它的氢谱与碳谱分析，其符合C6-C3-C3-C6苯并呋喃类木脂素化合物的结构特征。HMBC图谱中(图2)，C-1′与H-7′，H-8′存在远程偶合，提示反式双键与AM型苯环连接；H-7′，8′与羰基C-9′存在远程偶合，提示羧基位于反式双键α位形成共轭；C-1与H-7，C-6′与H-8存在远程偶合，H-7，H-9与C-8存在远程偶合，说明2个苯环间通过C-7，8连接，且C-8与C-9邻近。进一步与文献报道化合物aegineoside对比[4]，可以发现它们的核磁共振氢谱与碳谱非常类似，提示化合物1与aegineoside有着相同的苷元，不同处在于糖链接位置。糖的连接位置可以通过HMBC谱辨别：葡萄糖端基质子Glc-H-1″与C-9存在远程偶合，提示葡萄糖与C-9连接成苷。端基质子的偶合常数δH 4.24(1H，d，J=7.7 Hz)提示葡萄糖的相对构型为β-型。糖的绝对构型通过水解衍生化实验，与D型吡喃葡萄糖比较确定，具体步骤参见文献[5]。在HMBC谱中，由甲氧基质子3′-OMe与C-3′，3-OMe与C-3间远程偶合可分别确定2个甲氧基归属。呋喃环的立体构型通过H-7和H-8之间的偶合常数(J=7.3 Hz)来判断，偶合常数6-8 Hz提示其为反式构型[6]。综上所述，可推断化合物1结构为2，3-(trans)-dihydro-2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-[(β-D-glucopyranosyloxy)methyl]-7-methoxybenzofuran-5-propenoic acid。, 百拇医药(李金晟 王光寅 郭夫江 李医明)
[关键词]茄科； 茄属； 水茄； 木脂素苷； 甾体皂苷
茄科Solanaceae茄属Solanum植物多为草本，亚灌木，灌木至小乔木，亦有藤本，全世界共计约2 000种，我国有39种，分布广泛。水茄Solanum torvum又名金纽扣，天茄子，洋毛辣等，分布于我国两广，云南，台湾，其根茎入药，具有活血消肿止痛的功效，用于胃痛，痧症，闭经，跌打损伤等[1]。水茄的化学成分研究显示水茄中含有多种甾体类皂苷成分[2-3]，其中部分单体显示出一定的细胞毒作用[3]。本课题组对水茄果实中的甾体皂苷类化学成分进行分离，共获得1个新的木脂素苷类化合物(1)及5个已知的甾体皂苷化合物(2～6)。化合物1(图1)与已知化合物aegineoside有着相同的苯并呋喃类木脂素苷元，不同处在于糖链接位置由4位变成9位。
, 百拇医药
1材料
Brucker AM 400 型核磁共振仪；Nicolet-Magna-750 FTIR 光谱仪；Perkin-Elmer 341 型旋光仪； Finnigan LCQ Deca XP 电喷雾质谱，Waters Micromass Q-TOF ultima Globe电喷雾质谱；Agilent 1200型高效液相色谱仪；Agilent Eclipse XDB-C18(9.4 mm×250 mm，5 μm) 色谱柱；TLC板 HF254(烟台汇友硅胶有限公司)；柱色谱用硅胶200～300，300～400目，色谱硅胶(青岛海洋化学工厂用品)，GE 公司Sephadex LH-20；Fuji公司ODS柱色谱反相硅胶，三菱化学MCI GEL填料。试剂由国药集团化学试剂有限公司生产，均为分析纯。
药材采自广西，经上海中医药大学赵志礼教授鉴定为水茄S. torvum。
2提取与分离
, 百拇医药
干燥水茄果实5 kg粉碎至颗粒状，以95%乙醇浸没回流提取2 h，重复3次。剩余药材以50%乙醇浸没回流提取2 h。合并50%乙醇部分滤液，减压浓缩至无醇味后，过大孔树脂柱，依次以水，20%，40%，60%乙醇洗脱。大孔树脂60%乙醇组分再使用20%，40%，60%，80%甲醇过MCI柱色谱梯度洗脱。80%甲醇洗脱部分以硅胶柱色谱分离，依次以20∶1，15∶1，10∶1，8∶1，6∶1，4∶1乙酸乙酯-甲醇系统梯度洗脱，得到6个组分。其中，组分3以Sephadex LH-20(80%甲醇)洗脱，并通过半制备HPLC用30%乙腈制备获得化合物1(12 mg，tR=7.52 min)；组分4以Sephadex LH-20(80%甲醇)洗脱，并通过半制备HPLC用34%乙腈制备获得化合物3(13 mg， tR=7.84 min)，5(23 mg， tR=8.22 min)；组分5以ODS(40%乙腈)洗脱，并通过半制备HPLC用60%甲醇制备获得化合物4(3 mg， tR=8.01 min)；组分6以Sephadex LH-20 (60%甲醇)洗脱，并通过半制备HPLC用52%乙腈制备获得化合物2(15 mg， tR=7.34 min)，6(20 mg， tR=10.81 min)。
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3结构鉴定
化合物1为淡黄色固体，HR-ESI-MS m/z 557.163 3 [M+Na]+(计算值557.163 5)，提示其分子式为C26H30O12。红外数据显示分子结构中含共轭羰基结构(1 639 cm-1)，苯环(1 519，1 498 cm-1)以及C-O振动(1 213，1 146 cm-1)。氢谱数据中δH 6.97(1H，br s，H-2)，6.75(1H，d，J=8.3 Hz，H-5)，6.78(1H，d，J=8.3 Hz，H-6)，3个质子的偶合常数及裂分提示其为AMX型三取代苯环上质子；7.05(1H，s，H-2′)，7.24(1H，s，H-6′)为AM型四取代苯环上2个氢信号；δH 6.34(1H，d，J=15.9 Hz，H-8′)，7.29(1H，d，J=15.9 Hz，H-7′)为反式双键质子信号；δH 3.74(3H，s)； 3.79(3H，s)为甲氧基质子信号；δH 4.24(1H，d，J=7.7 Hz)为葡萄糖的端基质子信号。碳谱及DEPT-135中显示化合物1含有26个碳原子，其中包括14个芳香碳原子信号或双键碳原子信号，1个羧基碳原子信号以及6个糖上碳原子信号，2个甲氧基信号，2个CH(其中1个与氧原子相连δC 87.8)，以及1个CH2信号。除掉2个甲氧基和糖信号，剩余18个碳原子，再结合它的氢谱与碳谱分析，其符合C6-C3-C3-C6苯并呋喃类木脂素化合物的结构特征。HMBC图谱中(图2)，C-1′与H-7′，H-8′存在远程偶合，提示反式双键与AM型苯环连接；H-7′，8′与羰基C-9′存在远程偶合，提示羧基位于反式双键α位形成共轭；C-1与H-7，C-6′与H-8存在远程偶合，H-7，H-9与C-8存在远程偶合，说明2个苯环间通过C-7，8连接，且C-8与C-9邻近。进一步与文献报道化合物aegineoside对比[4]，可以发现它们的核磁共振氢谱与碳谱非常类似，提示化合物1与aegineoside有着相同的苷元，不同处在于糖链接位置。糖的连接位置可以通过HMBC谱辨别：葡萄糖端基质子Glc-H-1″与C-9存在远程偶合，提示葡萄糖与C-9连接成苷。端基质子的偶合常数δH 4.24(1H，d，J=7.7 Hz)提示葡萄糖的相对构型为β-型。糖的绝对构型通过水解衍生化实验，与D型吡喃葡萄糖比较确定，具体步骤参见文献[5]。在HMBC谱中，由甲氧基质子3′-OMe与C-3′，3-OMe与C-3间远程偶合可分别确定2个甲氧基归属。呋喃环的立体构型通过H-7和H-8之间的偶合常数(J=7.3 Hz)来判断，偶合常数6-8 Hz提示其为反式构型[6]。综上所述，可推断化合物1结构为2，3-(trans)-dihydro-2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-[(β-D-glucopyranosyloxy)methyl]-7-methoxybenzofuran-5-propenoic acid。, 百拇医药(李金晟 王光寅 郭夫江 李医明)