2.4Real-time RT-PCR分析 总RNA的提取：MCF-7传代细胞以5×104个/mL接种于6孔板，12 h之后更换无酚红DMEM/F12培养基(含5%CS-FBS)培养48 h，之后分别换已含0.001 μmol·L^-1 E2，10 μmol·L^-1的染料木黄酮和淫羊藿苷的无酚红DMEM/F12培养基(含5%CS-FBS)培养，每组3个重复。药物处理12，24，36，48 h后，Trizol提取细胞总RNA，紫外分光光度计检测浓度。

    逆转录：调整总RNA的浓度至50 mg·L^-1，取4 μL将其逆转录为cDNA(40 μL体系)，逆转录体系PCR扩增体系及反应条件均参照说明书设定。

    PCR扩增：以逆转录所得到的cDNA作为标准品，经等比稀释之后，分别利用ERα，ERβ，PS2，PR的引物进行PCR反应制备标准曲线，经内参校正，分别求得目的基因的相对表达量。RT-PCR数据分析采用ΔΔCt法 ......