信宜润楠中的黄酮类成分(1)
[摘要]通过大孔吸附树脂、正相硅胶、Sephadex LH-20柱色谱，以及反相闪式柱色谱和HPLC等多种分离方法相结合，从信宜润楠95%乙醇提物中首次分离得到12个黄酮类化合物；借助红外、质谱和核磁共振等波谱学分析方法分别鉴定为(+)-儿茶素(1)、(-)-表儿茶素(2)、3′-甲氧基-(+)-儿茶素(3)、3′-甲氧基-(-)-表儿茶素(4)、3，5，7，2′，5′-五羟基黄烷(5)、(-)-柚皮素(6)、(-)-圣草酚(7)、(-)-甘草素(8)、(2R，3R)-(+)-二氢山柰酚(9)、(2R，3S)-(-)-二氢山柰酚(10)、(2R，3R)-(+)-紫杉叶素(11)和槲皮素(12)；其中，化合物1～10为首次从润楠属植物中分离得到。
[关键词]润楠属；信宜润楠；黄酮类；分离和结构鉴定
信宜润楠Machilus wangchiana为樟科Lauraceae润楠属Machilus植物。该属植物资源丰富，多种被传统医药广泛使用，具有镇痛，消炎，抗感染等作用，用于治疗腹胀，腹泻，扭挫伤等。迄今为止，国内外除对红楠M. thunbergii化学成分的研究较多外，其他植物的研究报道很少。作为润楠属植物化学成分和生物活性多样性研究的内容，作者近年来对瑶山润楠M. yaoshansis[1-6]、粗壮润楠M. robusta[7-9]和信宜润楠M. wangchiana[10-12]开展了较为系统的研究，已发现并报道了结构复杂多样的百余个化学成分及其多方面的药理活性。本文继续报道信宜润楠乙醇提取物中12个黄酮类化合物的分离和结构鉴定结果；其中，10个化合物为首次从该属植物中分离得到。
, http://www.100md.com
1 仪器与材料
Perkin-Elmer 343型旋光仪，Inova-500核磁共振仪，Micromass Autospec-Ultima ETOF型、Q-Trap LC-MS/MS(Turbo Ionspray source)型、JMS-T100CS AccuToF CS型质谱仪。Waters 600高效液相色谱仪(Alltech公司)， Econosphere C18制备柱(22 mm×250 mm， 5 μm)，Waters 2478型检测器。薄层色谱硅胶GF254、柱色谱硅胶(160～200目和200～300目)均为青岛海洋化工厂生产。Sephadex LH-20为瑞典Amershan Pharmacia公司生产。TLC暗斑在紫外灯254 nm或365 nm下观察，通过碘熏或喷5%硫酸乙醇溶液后加热显色检测。
样品于2006年8月采自广西大瑶山，由广西林业局龙光日工程师鉴定为信宜润楠M. wangchiana，标本现存于中国医学科学院药物研究所植物标本室，标本号为No. YG06009。
, 百拇医药
2 提取与分离
干燥的信宜润楠根茎5 kg，粉碎后用95%乙醇浸渍提取3次，每次48 h，提取液合并，减压回收溶剂得浸膏360 g。将浸膏(360 g)分散于2 500 mL水中，用乙酸乙酯萃取(2 500 mL×4次)，减压回收溶剂后得乙酸乙酯萃取部分(45 g)和水相部分(280 g)。
乙酸乙酯部分(45 g)进行硅胶柱(160～200目，600 g，8.5 cm×50 cm)色谱分离，用氯仿-甲醇(100∶0～0∶100)梯度洗脱，洗脱液经薄层色谱检测，合并组成相似的流份，回收溶剂得到10个洗脱部分(E-1～E-10)。
E-3(氯仿-甲醇50∶1洗脱)部分(4.9 g)经硅胶柱(200～300目，50 g)色谱分离，石油醚-丙酮(15∶1～1∶1)梯度洗脱，得到7个洗脱组分(E-3-1～E-3-7)。组分E-3-6(451 mg)经Sephadex LH-20柱(100 g，3 cm×100 cm，氯仿-甲醇3∶1洗脱)色谱分离后，再经硅胶柱色谱(200～300目，10 g)分离纯化，石油醚-丙酮(8∶1)洗脱，得到化合物7(51 mg)、8(27 mg)和9(46 mg)。组分E-3-7经石油醚-丙酮重结晶得到化合物11(120 mg)。E-4(氯仿-甲醇30∶1洗脱)部分(2.8 g)经硅胶柱(200～300目，30 g)色谱分离，氯仿-甲醇(50∶1～5∶1)梯度洗脱，得到10个洗脱组分(E-4-1～E-4-10)。组分E-4-3(59 mg)经Sephadex LH-20柱(50 g，1.5 cm×100 cm，氯仿-甲醇2∶1洗脱)色谱分离后，再经反相半制备HPLC(C18，10 mm×250 mm， 5 μm)色谱分离，以MeOH-H2O(6∶4)为流动相，得到化合物3(7.2 mg)和4(10.3 mg)。组分E-4-10经石油醚-丙酮重结晶得到化合物12(221 mg)。E-5(氯仿-甲醇20∶1洗脱)部分(5.4 g )经硅胶柱(200～300目，50 g)色谱分离，氯仿-甲醇(50∶1～2∶1)梯度洗脱，得到14个洗脱部分(E-5-1～E-5-14)。E-5-5(173 mg)经Sephadex LH-20柱(50 g，1.5 cm×100 cm，氯仿-甲醇2∶1洗脱)色谱分离，得到化合物6(71 mg)。组分E-5-8用乙酸乙酯-丙酮重结晶得到化合物2(2.7 g)，母液经反相半制备HPLC(C18， 5 μm，10 mm×250 mm)色谱分离，以MeOH-H2O(1∶1)为流动相，得到化合物1(23.8 mg)。E-7(氯仿-甲醇8∶1洗脱)部分(4.9 g)经Sephadex LH-20柱(100 g，3 cm×100 cm，甲醇洗脱)分离，得到11个组分(E-7-1～E-7-11)。组分E-7-8(410 mg)经反相半制备HPLC(C18， 10 mm×250 mm，5 μm)色谱，以MeOH-H2O(3.5∶6.5)为流动相，得到化合物5(6.7 mg)和10(7.4 mg)。, http://www.100md.com(程伟 许文东 樊晓娜 石建功)
[关键词]润楠属；信宜润楠；黄酮类；分离和结构鉴定
信宜润楠Machilus wangchiana为樟科Lauraceae润楠属Machilus植物。该属植物资源丰富，多种被传统医药广泛使用，具有镇痛，消炎，抗感染等作用，用于治疗腹胀，腹泻，扭挫伤等。迄今为止，国内外除对红楠M. thunbergii化学成分的研究较多外，其他植物的研究报道很少。作为润楠属植物化学成分和生物活性多样性研究的内容，作者近年来对瑶山润楠M. yaoshansis[1-6]、粗壮润楠M. robusta[7-9]和信宜润楠M. wangchiana[10-12]开展了较为系统的研究，已发现并报道了结构复杂多样的百余个化学成分及其多方面的药理活性。本文继续报道信宜润楠乙醇提取物中12个黄酮类化合物的分离和结构鉴定结果；其中，10个化合物为首次从该属植物中分离得到。
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1 仪器与材料
Perkin-Elmer 343型旋光仪，Inova-500核磁共振仪，Micromass Autospec-Ultima ETOF型、Q-Trap LC-MS/MS(Turbo Ionspray source)型、JMS-T100CS AccuToF CS型质谱仪。Waters 600高效液相色谱仪(Alltech公司)， Econosphere C18制备柱(22 mm×250 mm， 5 μm)，Waters 2478型检测器。薄层色谱硅胶GF254、柱色谱硅胶(160～200目和200～300目)均为青岛海洋化工厂生产。Sephadex LH-20为瑞典Amershan Pharmacia公司生产。TLC暗斑在紫外灯254 nm或365 nm下观察，通过碘熏或喷5%硫酸乙醇溶液后加热显色检测。
样品于2006年8月采自广西大瑶山，由广西林业局龙光日工程师鉴定为信宜润楠M. wangchiana，标本现存于中国医学科学院药物研究所植物标本室，标本号为No. YG06009。
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2 提取与分离
干燥的信宜润楠根茎5 kg，粉碎后用95%乙醇浸渍提取3次，每次48 h，提取液合并，减压回收溶剂得浸膏360 g。将浸膏(360 g)分散于2 500 mL水中，用乙酸乙酯萃取(2 500 mL×4次)，减压回收溶剂后得乙酸乙酯萃取部分(45 g)和水相部分(280 g)。
乙酸乙酯部分(45 g)进行硅胶柱(160～200目，600 g，8.5 cm×50 cm)色谱分离，用氯仿-甲醇(100∶0～0∶100)梯度洗脱，洗脱液经薄层色谱检测，合并组成相似的流份，回收溶剂得到10个洗脱部分(E-1～E-10)。
E-3(氯仿-甲醇50∶1洗脱)部分(4.9 g)经硅胶柱(200～300目，50 g)色谱分离，石油醚-丙酮(15∶1～1∶1)梯度洗脱，得到7个洗脱组分(E-3-1～E-3-7)。组分E-3-6(451 mg)经Sephadex LH-20柱(100 g，3 cm×100 cm，氯仿-甲醇3∶1洗脱)色谱分离后，再经硅胶柱色谱(200～300目，10 g)分离纯化，石油醚-丙酮(8∶1)洗脱，得到化合物7(51 mg)、8(27 mg)和9(46 mg)。组分E-3-7经石油醚-丙酮重结晶得到化合物11(120 mg)。E-4(氯仿-甲醇30∶1洗脱)部分(2.8 g)经硅胶柱(200～300目，30 g)色谱分离，氯仿-甲醇(50∶1～5∶1)梯度洗脱，得到10个洗脱组分(E-4-1～E-4-10)。组分E-4-3(59 mg)经Sephadex LH-20柱(50 g，1.5 cm×100 cm，氯仿-甲醇2∶1洗脱)色谱分离后，再经反相半制备HPLC(C18，10 mm×250 mm， 5 μm)色谱分离，以MeOH-H2O(6∶4)为流动相，得到化合物3(7.2 mg)和4(10.3 mg)。组分E-4-10经石油醚-丙酮重结晶得到化合物12(221 mg)。E-5(氯仿-甲醇20∶1洗脱)部分(5.4 g )经硅胶柱(200～300目，50 g)色谱分离，氯仿-甲醇(50∶1～2∶1)梯度洗脱，得到14个洗脱部分(E-5-1～E-5-14)。E-5-5(173 mg)经Sephadex LH-20柱(50 g，1.5 cm×100 cm，氯仿-甲醇2∶1洗脱)色谱分离，得到化合物6(71 mg)。组分E-5-8用乙酸乙酯-丙酮重结晶得到化合物2(2.7 g)，母液经反相半制备HPLC(C18， 5 μm，10 mm×250 mm)色谱分离，以MeOH-H2O(1∶1)为流动相，得到化合物1(23.8 mg)。E-7(氯仿-甲醇8∶1洗脱)部分(4.9 g)经Sephadex LH-20柱(100 g，3 cm×100 cm，甲醇洗脱)分离，得到11个组分(E-7-1～E-7-11)。组分E-7-8(410 mg)经反相半制备HPLC(C18， 10 mm×250 mm，5 μm)色谱，以MeOH-H2O(3.5∶6.5)为流动相，得到化合物5(6.7 mg)和10(7.4 mg)。, http://www.100md.com(程伟 许文东 樊晓娜 石建功)