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编号:12635399
丹参—人参组分配伍对肺癌A549增殖、凋亡和骨架的影响(2)
http://www.100md.com 2014年11月15日 中国中药杂志 2014年第22期
     2.5流式细胞仪检测细胞凋亡取培养至对数期的A549细胞,用0.25%胰酶消化,用滴管吹打至单细胞悬液,调整细胞密度为1×105个/mL,接种于6孔板上,每孔1 mL,设给药组和阴性对照组,置于37 ℃,5%CO2的饱和湿度培养箱中培养24 h后,给药加入组分有效配伍E供试品溶液,每孔1 mL,阴性对照组加入等体积的细胞培养液,每组设3个复孔。将培养板置入37 ℃,5%CO2培养箱中分别培养12,24,48 h。收集细胞及相应的细胞上清液,用PBS洗涤细胞2次,2 000 r·min-1离心5 min,去上清后,加入500 μL Binding Buffer悬浮细胞,再加入5 μL AnnexinV-FITC混匀后,加入5 μL PI染液,混匀,室温避光反应15 min,1 h内进行流式细胞仪的检测。

    2.6高内涵细胞成像系统分析细胞骨架将细胞消化悬浮于培养液中,吹打均匀调整细胞密度为1×104个/mL,接种每孔100 μL细胞悬液,置于37 ℃,5%CO2饱和湿度培养箱中培养24 h后给药,分阴性对照组和给药组。阴性对照组加入等体积的细胞培养液,给药组加入组分有效配伍E供试品溶液 ......
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