2.7Western blotting 检测衰老相关蛋白表达分别收集对照组和40 mg·L^-1的当归多糖处理48 h后的CD34+CD38--LSCs，PBS洗涤1次，转入EP管中，加入细胞裂解液重悬细胞，冰上裂解45 min后低温下14 000×g离心5 min，收集上清，BCA试剂盒测定各组蛋白浓度。各组取等量蛋白经SDS-PAGE电泳后转移至PVDF膜，5%脱脂奶粉摇床封闭2 h，加1∶2 000稀释的Anti-P16和1∶800稀释的Anti-Rb，4 ℃孵育过夜;TBST缓冲液漂洗1 h后加1∶5 000稀释的辣根过氧化物酶标记的羊抗兔二抗，室温孵育1.5 h;TBST漂洗1 h;ECL增强发光试剂显色后凝胶呈像仪照相。

    2.8统计学分析用SPSS 16.0软件对数据进行统计学分析，计量资料以±s表示，组间比较采用t检验，P<0.05为有统计学意义。

    3结果

    3.1CD34+ CD38--LSCs的分选与纯化采用免疫磁性分选法成功从急性髓系白血病患者的骨髓单个核细胞中获得CD34+CD38--LSCs ......