蒲黄—五灵脂配伍前后效应成分变化及其抗血小板聚集和抗凝血酶活性评价(3)
2.2.2家兔体外抗凝血功能(TT，PT)评价试验上述贫血小板血浆(PPP)-20 ℃保存，临用前放置至室温，作为待测血浆。抗凝血活性主要是通过凝血酶时间(TT)，凝血酶原时间(PT)，操作步骤按试剂盒所述操作要求进行。
TT的测定：测试杯中加入搅拌珠、待测药物(对照组加入等量溶剂)10 μL、待测血浆，37 ℃温育3 min后，加入pH 7.4 Tris-HCL缓冲液稀释的10 U·mL-1凝血酶溶液50 μL，测定凝血时间，凝血时间延长率=(给药组凝血时间-对照组凝血时间)/对照组凝血时间×100%。
PT的测定：向有磁珠的测试杯中加入50 μL血浆，37 ℃预温180 s，再加入100 μL PT试剂，同时按Start，至磁珠停止运动液晶屏上显示数据后记录数据。
2.3统计学方法
实验数据以±s表示，组间比较采用t检验，P<0.05有统计学意义，并计算IC50。
2.4UPLC-MS分析条件
色谱条件：Acquity UPLC C18色谱柱(2.1 mm×50 mm ......
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TT的测定：测试杯中加入搅拌珠、待测药物(对照组加入等量溶剂)10 μL、待测血浆，37 ℃温育3 min后，加入pH 7.4 Tris-HCL缓冲液稀释的10 U·mL-1凝血酶溶液50 μL，测定凝血时间，凝血时间延长率=(给药组凝血时间-对照组凝血时间)/对照组凝血时间×100%。
PT的测定：向有磁珠的测试杯中加入50 μL血浆，37 ℃预温180 s，再加入100 μL PT试剂，同时按Start，至磁珠停止运动液晶屏上显示数据后记录数据。
2.3统计学方法
实验数据以±s表示，组间比较采用t检验，P<0.05有统计学意义，并计算IC50。
2.4UPLC-MS分析条件
色谱条件：Acquity UPLC C18色谱柱(2.1 mm×50 mm ......
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