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编号:12730847
流式微球技术在小分子物质高通量快速检测中的应用(2)
http://www.100md.com 2015年9月15日 《中国中药杂志》2015年第18期
     1 流式微球技术简介

    流式微球技术[13-14]通过激光束激发荧光编码微球,利用流式细胞仪分析微球本身和表面所携带的信息量完成数据收集和分析。其检测原理为:不同荧光素配比的编码微球顺次高速通过流式细胞仪分析系统的检测区,微球及其表面荧光探针经双色激光激发,红色激光(635 nm)激发微球本体的荧光物质,发射的荧光和散射光同时被检测区的荧光通道接收,根据荧光强度可把各组编码微球分开。蓝色激光(488 nm)激发微球表面报告分子上的荧光物质,发射的荧光被检测区的另外荧光通道接收,通过计算机的高速数字信号处理器,可以自动统计分析得出各个微球复合物上的平均荧光强度,从而对待测样品中目标物质进行定量。

    流式微球技术检测小分子物质的分析模式如下所述。流式微球技术是荧光微球与流式细胞仪相结合而产生的新型分析技术,以高分子荧光微球、特异性识别探针、荧光报告分子共同构成小分子物质快速检测体系。目前,基于“双抗体夹心式”[15-16]免疫模式,流式微球技术在细胞因子、生长因子等大分子物质检测中得到较多应用。而小分子物质的相对分子质量小于1000(1 kDa)道尔顿,具有半抗原性、相对分子质量小、单一抗原表位、本身不具免疫原性等特点[17-18],只有1个可与抗体结合的位点, 不能发生“双抗体夹心式”的免疫反应,所以在小分子物质检测中多采用基于抗体抗原特异性识别的竞争型免疫分析模式 ......
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