利用一种耐热耐糖β葡萄糖苷酶制备黄芩素的研究(2)
2.2.2酶解率的测定 测定时,用乙酸乙酯回流提取酶解样品液数次,合并乙酸乙酯并补至500 mL, 取10 mL稀释100倍后于275 nm处测吸光度A, 根据黄芩素标准曲线及下式计算酶解率。酶解率=5×10-5×C×Mg/m×100%
上式中C为黄芩素浓度(μmol·L-1);m为黄芩苷质量(g);Mg为黄芩苷相对分子质量。
2.3酶解反应速率的测定
在酶解一定时间(t,min)的样品液中加入适量乙酸乙酯回流,终止酶解反应同时提取酶解样品液, 按2.2.1测定吸光度, 并按黄芩素标准曲线和下式计算酶解反应速率vs(以产物黄芩素的增加量为准,C, μmol·L-1 ; vs, mmol·L-1·min-1):vs =C/(1 000T)。
2.4不同因素对酶解反应的影响
2.4.1酶的最适反应温度 分别在60 ......
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