银翘散水煎液煎煮过程化学特征图谱及指标成分含量变化规律的研究(2)

http://www.100md.com 2016年1月1日 《中国中药杂志》2016年第1期

     2.4.2稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液5μL，分别于0，4，8，12，16，20，24 h进样测定，记录色谱图一以牛蒡苷为参照峰，计算特征峰的相对保留时间及相对峰面积，结果各特征峰的相对保留时间的RSD<1.0%，单峰面积占总峰面积大于2%的特征峰的相对峰面积的RSD<1.5%，相似度为0.992。结果表明，供试品溶液于24 h内测定结果稳定。

    2.4.3重复性试验

    取同一银翘散水煎液6份，0.45μm微孔滤膜滤过，制备供试品溶液，精密吸取供试品溶液5μL，分别进样测定，记录色谱图。以牛蒡苷为参照峰，计算特征峰的相对保留时间及相对峰面积，结果各特征峰的相对保留时间的RSD<1.0%，单峰面积占总峰面积大于2%的特征峰的相对峰面积的RSD<1.5%，相似度为0.988。结果表明，该方法重复性好。

    2.4.4银翘散化学特征图谱的建立 取不同煎煮时间的银翘散水煎液样品，精密吸取5μL，分别进样测定，记录60 min的HPLC图。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004 A)”进行数据分析处理，设定S1(浸泡20min)为参照图谱，将其他样品的色谱峰与参照图谱进行自动匹配，生成银翘散对照指纹图谱(图1)，计算S1～S13样品与对照指纹图谱的相似度，分别为0.928，0.981，0.992，0.993，0.994，0.996，0.997，0.996，0.994，0.993，0.993，0.990 ......