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编号:12770907
茅苍术及其麸炒品对胃溃疡大鼠抗炎作用的比较研究(3)
http://www.100md.com 2016年2月15日 中国中药杂志2016年第4期
     2.5 ELISA法检测血清及胃组织中IL-6,IL-8,TNF-α和PGE2的含量 将胃组织自然解冻后,剪碎,称重,按9 mL·g-1加PBS液匀浆,得到胃组织匀浆液,血清样品自然解冻。用酶联免疫吸附实验法(ELISA)检测血清及胃组织中IL-6,IL-8,TNF-α和PGE2的含量,实验严格按照大鼠酶联免疫检测试剂盒使用说明书操作,用多功能酶标仪进行检测,波长450 nm测定吸光度(A)。根据对照品的浓度及对应的A,计算出相应标准曲线的直线回归方程,再根据样品的A在回归方程上计算出对应的样品浓度。

    2.6 实时荧光定量RT-PCR法检测胃组织中IL-8和TNF-α mRNA的表达 取胃组织100 mg剪碎,按 Trizol试剂盒说明书操作,提取总RNA,即苯酚/三氯甲烷提取,异丙醇沉淀法。取总RNA 0.5 μg,使用PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser试剂盒,按说明书操作将RNA反转录成cDNA(37 ℃ 15 min,85 ℃ 5 s)。DNA扩增按照Brilliant Ⅲ Ultra-Fast SYBR Green QPCR Master Mix试剂盒说明书操作 ......
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