蝎毒多肽逆转白血病干细胞多药耐药作用的研究(3)
2.6 Western blot法检测PI3K蛋白 剪取1 g中心部位的瘤组织，加1 mL液氮研磨，200 μL蛋白裂解液，吹打混匀，取上清总蛋白，采用BCA方法测蛋白浓度。样本煮沸转移蛋白至PVDF，0.5%脱脂牛奶室温封闭PVDF膜1 h，分别加入一抗40 ℃孵育过夜，0.1% TEST洗膜3次，室温孵育加入二抗1 h，TBST洗膜3次，加ECL发光剂后显影。
2.7 Elisa法检测NF-κB含量 剪取1 g中心部位的瘤组织，预冷研磨，5 000×g离心5 min，留取上清。严格按照试剂盒说明书步骤，在酶标板分别设标准孔、待测样品孔、空白孔，依次加A液、B液。终止反应后用酶标仪在450 nm 波长测量各孔的吸光度(A)，通过标准曲线计算NF-κB浓度。
2.8 统计学方法 采用SPSS 16.0统计软件进行分析，计量资料用±s表示，先行方差齐性检验和正态性检验，再行组间均数F检验，检验水准α=0.05。组间比较采用单因素方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。
3 结果
3.1 K562/A02干细胞耐药性 对数生长期K562/A02细胞，流式细胞仪检测CD34+CD38-细胞占31.5% ......
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2.7 Elisa法检测NF-κB含量 剪取1 g中心部位的瘤组织，预冷研磨，5 000×g离心5 min，留取上清。严格按照试剂盒说明书步骤，在酶标板分别设标准孔、待测样品孔、空白孔，依次加A液、B液。终止反应后用酶标仪在450 nm 波长测量各孔的吸光度(A)，通过标准曲线计算NF-κB浓度。
2.8 统计学方法 采用SPSS 16.0统计软件进行分析，计量资料用±s表示，先行方差齐性检验和正态性检验，再行组间均数F检验，检验水准α=0.05。组间比较采用单因素方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。
3 结果
3.1 K562/A02干细胞耐药性 对数生长期K562/A02细胞，流式细胞仪检测CD34+CD38-细胞占31.5% ......
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