丹参主产区AMF的多样性研究(1)
[摘要]该文对丹参主产区涉及的8个省20个采样点丹参根围丛枝菌根真菌(AMF)的种属构成、侵染情况、种类组成相似性进行研究。结果表明：丹参根围AMF种类丰富，共分离出7属27种AMF，分别为无梗囊霉屬Acaulospora、球囊霉属Glomus、管孢囊霉属Funneliformis、两性囊霉属Ambispora、根生囊霉属Rhizophagus、和平囊霉属Pacispora、近明囊霉属Claroideoglomus。无梗囊霉属(9种，333%)、球囊霉属(8种，296%)两属是优势属；光壁无梗囊霉A laevis(90%)、木薯根生囊霉R manihotis (80%)、双网无梗囊霉A brieticulata (75%)、疣状无梗囊霉A tuberculata(70%)等4种AMF是丹参根围的优势种。丹参普遍受AMF侵染，但侵染强度不高，侵染率1092%～2593%。各主产区之间的AMF物种组成相似性系数为020～057，相似性普遍较低。丹参根围AMF种类总体上表现出丰富的多样性，不同产区的AMF物种分布存在相似性和地域性。
, http://www.100md.com [关键词]丛枝菌根真菌； 丹参； 多样性； 侵染率； 形态鉴定
丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi，AMF)是自然界中分布最广泛的植物营养专性共生菌，能与80%以上的陆生高等植物共生形成菌根结构[1]。AMF与植物共生后，能够促进宿主植物吸收及利用矿质元素与水分[23]，调节宿主体内代谢[4]，增强抗逆性[57]，促进植物生长，提高作物产量和品质[78]。研究表明，丹参能与AMF形成良好的共生关系，促进宿主根系吸收水分及矿质元素，改善体内生理代谢，促进丹参生长[8]，缓解连作障碍[7]等作用。
丹参属多道地药材，AMF群落分布受地理环境影响明显[9]。然而，不同地域丹参根围AMF群落的多样性研究较少，AMF与各产区药材质量的关系有待阐明。因此，本研究采集丹参主产区涉及的8个省、20个采样点的丹参根围土，进行丹参主产区AMF物种多样性调查，以期弄清丹参根围AMF组成，为AMF菌剂的开发及应用提供一定的参考依据，并为AMF资源保护和利用奠定基础。
, 百拇医药
1材料与方法
11样品的采集及预处理2007年11月，于山东、河南、四川、陕西、山西、安徽、河北和江苏8个省的20个县采集丹参根围土样及植物样品。采用多点混合法与平行采样对照法，轻轻地去掉丹参周围的枯枝落叶层，用小铲轻轻挖掉表面的浮土，运用抖根法收集20～25株植株根围的土样，最后经四分法保留2 kg，土样装入牛皮纸袋中于4 ℃冰箱保存，并记录采样信息(表1)。每个样本平行采集3个土样，同时随行采集丹参根2 kg。取丹参的须根，将根样清水洗净后剪成1～15 cm长的根段，置于标准固定液(FAA固定液)中保存备用。
2土壤理化分析参考文献[1012]的方法，进行测定。pH用电位测定法，有机质用重铬酸钾法，全氮用CuSO4K2SO4混合消煮液，凯氏定氮法。全磷用Na2CO3熔融法。速效钾用NH4OAc浸提，AA300火焰原子吸收分光光度仪测定。
13根段侵染率测定采用碱解离乳酸甘油酸性品红染色法[1]测定根段侵染率。
, http://www.100md.com
14AMF形态鉴定采用湿筛倾注蔗糖离心法[1]，从丹参根围土壤中分离AMF孢子。在显微镜下观察AMF孢子形态特征，利用染色试剂，观察孢子的特异反应。综合以上观察结果，参照各属特征及检索表，和近几年发表的新种、新记录种，同时参照http：//invamcafwvuedu和http：//schuessler.userweb.mwn.de/amphylo/种的描述、图片及相应分类单元的原始发表进行鉴定。
15数据分析分离频度(isolation frequency，IF)：IF=×100%。IF≥50%为优势属(种)，IF=10%～50%为常见属(种)，IF<10%为偶见属(种)[1]。 Sorensen 群落相似性系数(C)：C=j/ (a+b)，式中j为2个不同产区AMF共有物种数，a，b 分别为2个产区全部 AMF物种数。AMF群落物种相似度划分为极低(<020)、 低(021～040)、中(041～060)、高(061～080)、极高(080～100)[13]。
, 百拇医药
2结果与分析
21土壤基本理化性质丹参生长土壤pH在56～87，平均值75，主要呈弱碱性至中性；有机质质量分数在054%～205%，平均121%，其中河北、山东、河南普遍较低，四川较高，总体属轻度贫瘠；氮质量分数在038～129 g·kg-1，平均083 g·kg-1，四川较高，总体属轻度贫瘠；磷质量分数在073～64 g·kg-1，平均3079 g·kg-1，总体属肥沃。钾质量分数在017～45 g·kg-1，平均2385 g·kg-1，总体属严重贫瘠，见表2。
22不同产地丹参AMF侵染情况不同产地丹参普遍受AMF侵染，见表2。但侵染强度不高，在不同的立地条件下，丹参的侵染率不同，其中山西芮城AMF侵染率最高，为2593%，江苏赣榆最低，为1092%，而山东4个产地的侵染率都比较接近，基本在20%左右。
23不同产地丹参根围AMF的种类和分布不同产地丹参根围土壤中AMF总数和种属构成存在差异，见表3。从山东、河南、四川、陕西、山西、安徽、河北、江苏8省20个采样点根际土壤样品中共分离出7属27种AMF，分别是无梗囊霉属Acaulospora、球囊霉属Glomus、管孢囊霉属Funneliformis、两性囊霉属Ambispora、根生囊霉属Rhizophagus、和平囊霉属Pacispora、近明囊霉属Claroideoglomus。其中，无梗囊霉属9种，占333%，其次是球囊霉属8种，占296%，这2属是丹参根围土壤中AMF的优势属。光壁无梗囊霉A laevis(90%)、木薯根生囊霉R manihotis(80%)、双网无梗囊霉A brieticulata(75%)、疣状无梗囊霉A tuberculata (70%)，是丹参根围土壤中AMF的优势种，且分布广泛。8个省中山西AMF种类最丰富，分离出6属14种AMF；其次是四川，有6属12种；再次是山东省和河南省，5属11种；其余产区种类相对较少，各分离出4属的AMF。, 百拇医药(柳敏 黄文丽 王潇 万瑞涵 王海 严铸云)
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丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi，AMF)是自然界中分布最广泛的植物营养专性共生菌，能与80%以上的陆生高等植物共生形成菌根结构[1]。AMF与植物共生后，能够促进宿主植物吸收及利用矿质元素与水分[23]，调节宿主体内代谢[4]，增强抗逆性[57]，促进植物生长，提高作物产量和品质[78]。研究表明，丹参能与AMF形成良好的共生关系，促进宿主根系吸收水分及矿质元素，改善体内生理代谢，促进丹参生长[8]，缓解连作障碍[7]等作用。
丹参属多道地药材，AMF群落分布受地理环境影响明显[9]。然而，不同地域丹参根围AMF群落的多样性研究较少，AMF与各产区药材质量的关系有待阐明。因此，本研究采集丹参主产区涉及的8个省、20个采样点的丹参根围土，进行丹参主产区AMF物种多样性调查，以期弄清丹参根围AMF组成，为AMF菌剂的开发及应用提供一定的参考依据，并为AMF资源保护和利用奠定基础。
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1材料与方法
11样品的采集及预处理2007年11月，于山东、河南、四川、陕西、山西、安徽、河北和江苏8个省的20个县采集丹参根围土样及植物样品。采用多点混合法与平行采样对照法，轻轻地去掉丹参周围的枯枝落叶层，用小铲轻轻挖掉表面的浮土，运用抖根法收集20～25株植株根围的土样，最后经四分法保留2 kg，土样装入牛皮纸袋中于4 ℃冰箱保存，并记录采样信息(表1)。每个样本平行采集3个土样，同时随行采集丹参根2 kg。取丹参的须根，将根样清水洗净后剪成1～15 cm长的根段，置于标准固定液(FAA固定液)中保存备用。
2土壤理化分析参考文献[1012]的方法，进行测定。pH用电位测定法，有机质用重铬酸钾法，全氮用CuSO4K2SO4混合消煮液，凯氏定氮法。全磷用Na2CO3熔融法。速效钾用NH4OAc浸提，AA300火焰原子吸收分光光度仪测定。
13根段侵染率测定采用碱解离乳酸甘油酸性品红染色法[1]测定根段侵染率。
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14AMF形态鉴定采用湿筛倾注蔗糖离心法[1]，从丹参根围土壤中分离AMF孢子。在显微镜下观察AMF孢子形态特征，利用染色试剂，观察孢子的特异反应。综合以上观察结果，参照各属特征及检索表，和近几年发表的新种、新记录种，同时参照http：//invamcafwvuedu和http：//schuessler.userweb.mwn.de/amphylo/种的描述、图片及相应分类单元的原始发表进行鉴定。
15数据分析分离频度(isolation frequency，IF)：IF=×100%。IF≥50%为优势属(种)，IF=10%～50%为常见属(种)，IF<10%为偶见属(种)[1]。 Sorensen 群落相似性系数(C)：C=j/ (a+b)，式中j为2个不同产区AMF共有物种数，a，b 分别为2个产区全部 AMF物种数。AMF群落物种相似度划分为极低(<020)、 低(021～040)、中(041～060)、高(061～080)、极高(080～100)[13]。
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2结果与分析
21土壤基本理化性质丹参生长土壤pH在56～87，平均值75，主要呈弱碱性至中性；有机质质量分数在054%～205%，平均121%，其中河北、山东、河南普遍较低，四川较高，总体属轻度贫瘠；氮质量分数在038～129 g·kg-1，平均083 g·kg-1，四川较高，总体属轻度贫瘠；磷质量分数在073～64 g·kg-1，平均3079 g·kg-1，总体属肥沃。钾质量分数在017～45 g·kg-1，平均2385 g·kg-1，总体属严重贫瘠，见表2。
22不同产地丹参AMF侵染情况不同产地丹参普遍受AMF侵染，见表2。但侵染强度不高，在不同的立地条件下，丹参的侵染率不同，其中山西芮城AMF侵染率最高，为2593%，江苏赣榆最低，为1092%，而山东4个产地的侵染率都比较接近，基本在20%左右。
23不同产地丹参根围AMF的种类和分布不同产地丹参根围土壤中AMF总数和种属构成存在差异，见表3。从山东、河南、四川、陕西、山西、安徽、河北、江苏8省20个采样点根际土壤样品中共分离出7属27种AMF，分别是无梗囊霉属Acaulospora、球囊霉属Glomus、管孢囊霉属Funneliformis、两性囊霉属Ambispora、根生囊霉属Rhizophagus、和平囊霉属Pacispora、近明囊霉属Claroideoglomus。其中，无梗囊霉属9种，占333%，其次是球囊霉属8种，占296%，这2属是丹参根围土壤中AMF的优势属。光壁无梗囊霉A laevis(90%)、木薯根生囊霉R manihotis(80%)、双网无梗囊霉A brieticulata(75%)、疣状无梗囊霉A tuberculata (70%)，是丹参根围土壤中AMF的优势种，且分布广泛。8个省中山西AMF种类最丰富，分离出6属14种AMF；其次是四川，有6属12种；再次是山东省和河南省，5属11种；其余产区种类相对较少，各分离出4属的AMF。, 百拇医药(柳敏 黄文丽 王潇 万瑞涵 王海 严铸云)