参照文献[1012]，采用磷酸盐缓冲液(磷酸二氢钾，氢氧化钠，蒸馏水)为水相，比较有机相甲醇和乙腈，使用乙腈时柱压相对平稳，减少磷酸盐缓冲液对高效液相色谱仪的损伤；通过改变两相的比例，找出样品出峰的最佳条件。空白样品中的峰为流动相梯度改变程度大所致，ATP，ADP，AMP在这个峰之前出峰，对样品分析没有干扰。比较水相pH为56，61，66时样品的色谱图，发现pH为61时，ATP，ADP，AMP出峰时间合理且分离度较好，故调整水相的pH为61。最佳色谱条件为有机相采用乙腈；流动相梯度0～20 min，0%乙腈；20～30 min，0～60%乙腈；30～45 min，0%乙腈；调节水相pH为61。

    样品处理过程中，比较剪心肌组织次数的不同(200，300，400，500，600次)对3种成分含量多少的影响，发现随着剪切次数的增加，3种成分的含量逐渐增加，剪心肌500与600次3种成分的含量接近，故处理样品时剪切次数为500；使用超声匀浆破碎仪将剪碎的心肌组织制成匀浆液，结果发现与不使用匀浆破碎仪的相同样品比较，ATP含量减少，AMP含量增加，提示ATP发生分解，故不使用超声破碎匀浆的方法；用氢氧化钾溶液调节样品的pH ......