太子参玉米黄质环氧化酶基因的克隆与表达分析(2)
本研究根据课题组前期构建的太子参转录组数据结合生物信息学分析,检索ABA合成相关的ZEP基因,采用PCR方法扩增ZEP基因的全长CDS序列,对所获得基因序列进行生物信息学分析,同时对ZEP基因在太子参的不同组织、不同生长发育时期以及ABA和氟啶酮(fluridone)处理后块根中的表达模式进行检测。为研究ZEP基因在药用植物太子参中ABA的合成途径中扮演着怎样的功能对进一步研究太子参块根发育过程的调控机制奠定研究基础。1 材料与方法
1.1 样品 研究所用材料有2类,一是贵州施秉本地种源采收期的太子参的茎、叶、块根和须根,样品采集后存于自封袋中带回实验室,将样品表面泥土冲洗干净,及时将块根分成韧皮部和木质部,分别置于10 mL离心管中,液氮速冻后置于-80 ℃冰箱保存备用。二是选取长势健壮一致的太子参幼苗采挖后带回实验室,盆栽置混合土中(普通土-营养土-珍珠岩-蛭石 3∶3∶1∶1),实验组分别采用200 mL的15 mg·L-1ABA,30 mg·L-1氟啶酮和ABA+氟啶酮溶液(等体积混合溶液)对不同盆栽太子参进行灌根 ......
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