应用基于LC—TOF—MS分析的质量亏损过滤方法筛选黄芪注射液中的皂苷类成分(1)
[摘要] 采用液相色谱与四极杆飞行时间质谱(LC-TOF-MS)联用技术分析黄芪注射液(HI)样品，获取正负离子模式下HI中化学成分的LC-TOF-MS分析数据。根据前期相关文献报道，建立黄芪皂苷类化合物的质量亏损过滤(MDF)方法，用于系统筛选HI中所含有的皂苷类成分。每个筛选化合物的存在需由不少于2个准分子离子进行确认。最后依据其母离子和子离子信息对所筛选的化合物进行初步鉴定。最终共从HI中筛选并初步鉴定出62个皂苷类化合物，其中15个为新发现的皂苷类化合物。鉴定结果提示，乙酰化、氢化、去氢化、甲氧基化和水化可能为HI中皂苷所涉及的主要转化反应。该研究丰富了黄芪化学物质基础研究内容，同时也表明基于LC-TOF-MS分析的MDF方法，是一种可行且有效的中药成分系统筛选工具。
[关键词] 黄芪注射液； 黄芪皂苷； 质量亏损过滤； LC-TOF-MS； 转化反应
[Abstract] The samples of Huangqi injection (HI) were analyzed by liquid chromatography coupled with quadrupole time-of-flight mass spectrometry (LC-TOF-MS)， and both positive and negative ion modes were employed to obtain the LC-TOF-MS analysis information of chemical compounds in HI. Then the mass defect filtering (MDF) approach， which was developed based on the previously published articles， was utilized to rapidly screen the astragalosides from the obtained LC-TOF-MS data. Each screened astragaloside was confirmed by the presence of no less than 2 quasi-molecular ions. All the screened astragalosides were then tentatively assigned according to the parent ion and daughter ion information. Finally， a total of 62 astragalosides were screened and characterized from the HI samples， including 15 new detected ones. The identification results indicated that acetylation， hydrogenation， dehydrogenation， methoxylation and hydration might be the major conversion reactions involved in the formation of the astragalosides. The LC-TOF-MS-based MDF approach was proved to be a feasible and efficient tool to screen the chemical constituents in complex matrices such as herbal medicines.
, http://www.100md.com
[Key words] Huangqi injections； astragalosides； mass defect filter； LC-TOF-MS； conversion reactions.
明確中药中所含有的化学成分信息，是阐明中药的药效物质基础，评价中药质量和安全性的前提和基础。高效液相-飞行时间质谱(LC-TOF-MS)联用技术非常适用于中药化学成分定性分析，特别是非目标性系统性定性分析[1-2]。然而，由于中药成分复杂，其LC-TOF-MS分析数据信息异常丰富，如何对其快速有效解析，以准确全面地提取中药成分信息一直是研究者的一大挑战。近年来，质量亏损过滤(mass defect filtering，MDF)方法作为一种TOF-MS等高分辨质谱数据的新型数据处理技术，已被一些研究证明可用于中药成分的系统分析，并具有一定的独特优势[3-4]。然而这些研究均具有一定的局限性，它们或者需要对照品比对[3]，或者没有考虑到化合物可能的加合离子[4]。黄芪注射液(HI)为已上市的临床常用黄芪制剂，皂苷类为其主要药效成分和制剂质量控制指标[5-6]。然而目前还没有对HI中皂苷类成分系统分析的研究报道。基于此，本研究结合前期文献报道和预试验结果，充分考虑皂苷类化合物可能产生的各种加合离子，建立了改进的黄芪皂苷类化合物的质量亏损过滤(MDF)方法，对HI中的皂苷类成分进行系统筛选和鉴定。
1 材料
LC (Agilent)-(AB) Triple TOFTM 5600液质联用仪，含Pump Agilent 1200G1312A，Column Oven Agilent 1200G1316A，Auto Sampler Agilent 1260G1367B和Triple TOF 5600 Mass spectrometer，LC-MS/MS系统由Analyst 1.6 Software 控制；CPA225D电子天平(德国Sartorius公司)；高速低温离心机(ThermoSorvall Legend Micro 17R)；WH2微型旋涡混合仪(上海沪西分析仪器厂)。, 百拇医药(宋慧婷 李长印 万瑶瑶 丁选胜 谭喜莹 戴国梁 刘史佳 居文政)
[关键词] 黄芪注射液； 黄芪皂苷； 质量亏损过滤； LC-TOF-MS； 转化反应
[Abstract] The samples of Huangqi injection (HI) were analyzed by liquid chromatography coupled with quadrupole time-of-flight mass spectrometry (LC-TOF-MS)， and both positive and negative ion modes were employed to obtain the LC-TOF-MS analysis information of chemical compounds in HI. Then the mass defect filtering (MDF) approach， which was developed based on the previously published articles， was utilized to rapidly screen the astragalosides from the obtained LC-TOF-MS data. Each screened astragaloside was confirmed by the presence of no less than 2 quasi-molecular ions. All the screened astragalosides were then tentatively assigned according to the parent ion and daughter ion information. Finally， a total of 62 astragalosides were screened and characterized from the HI samples， including 15 new detected ones. The identification results indicated that acetylation， hydrogenation， dehydrogenation， methoxylation and hydration might be the major conversion reactions involved in the formation of the astragalosides. The LC-TOF-MS-based MDF approach was proved to be a feasible and efficient tool to screen the chemical constituents in complex matrices such as herbal medicines.
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[Key words] Huangqi injections； astragalosides； mass defect filter； LC-TOF-MS； conversion reactions.
明確中药中所含有的化学成分信息，是阐明中药的药效物质基础，评价中药质量和安全性的前提和基础。高效液相-飞行时间质谱(LC-TOF-MS)联用技术非常适用于中药化学成分定性分析，特别是非目标性系统性定性分析[1-2]。然而，由于中药成分复杂，其LC-TOF-MS分析数据信息异常丰富，如何对其快速有效解析，以准确全面地提取中药成分信息一直是研究者的一大挑战。近年来，质量亏损过滤(mass defect filtering，MDF)方法作为一种TOF-MS等高分辨质谱数据的新型数据处理技术，已被一些研究证明可用于中药成分的系统分析，并具有一定的独特优势[3-4]。然而这些研究均具有一定的局限性，它们或者需要对照品比对[3]，或者没有考虑到化合物可能的加合离子[4]。黄芪注射液(HI)为已上市的临床常用黄芪制剂，皂苷类为其主要药效成分和制剂质量控制指标[5-6]。然而目前还没有对HI中皂苷类成分系统分析的研究报道。基于此，本研究结合前期文献报道和预试验结果，充分考虑皂苷类化合物可能产生的各种加合离子，建立了改进的黄芪皂苷类化合物的质量亏损过滤(MDF)方法，对HI中的皂苷类成分进行系统筛选和鉴定。
1 材料
LC (Agilent)-(AB) Triple TOFTM 5600液质联用仪，含Pump Agilent 1200G1312A，Column Oven Agilent 1200G1316A，Auto Sampler Agilent 1260G1367B和Triple TOF 5600 Mass spectrometer，LC-MS/MS系统由Analyst 1.6 Software 控制；CPA225D电子天平(德国Sartorius公司)；高速低温离心机(ThermoSorvall Legend Micro 17R)；WH2微型旋涡混合仪(上海沪西分析仪器厂)。, 百拇医药(宋慧婷 李长印 万瑶瑶 丁选胜 谭喜莹 戴国梁 刘史佳 居文政)