UPLC—Q—TOF—MS分析茜草炒炭前后的化学成分变化(1)
[摘要]为了探究茜草炒炭对化学成分的影响，利用超高效液相串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)分析茜草和茜草炭的成分，比较炒炭前后化学成分的变化，并运用主成分分析法(PCA)和正交偏最小二乘判别法(OPLS-DA)进行数据统计，寻找茜草炒炭前后的主要差异成分，同时依据一级质谱精确质荷比和二级质谱碎片信息进行结构解析。结果表明：茜草炒炭前后有6种差异较大的成分，根据其在生品和炭品中的峰面积值，选择其中的3种成分作为主要差异成分，并鉴定为光泽汀、异茜草素、1，3，6-三羟基-2-甲基蒽醌，且炒炭后异茜草素、1，3，6-三羟基-2-甲基蒽醌含量显著增加，光泽汀含量明显减少，可作为化学标记物区分生品和炭品。该实验的研究成果对于揭示茜草炒炭的炮制机制具有重要意义，也为茜草炭药效物质基础的阐明提供了重要依据。
[关键词] 茜草； 茜草炭； UPLC-Q-TOF-MS； PCA； OPLS-DA
[Abstract] In order to explore the effect on chemical constituents after carbonized， the changes of chemical constituents in raw and carbonized Rubiae Radix et Rhizoma were analyzed by UPLC-Q-TOF-MS. The research also used principal component analysis(PCA) and orthogonal partial least squares discriminant analysis(OPLS-DA) for data statistics to find out the main differences on components before and after carbonized. The accurate m/z values of Q-TOF-MS and Q-TOF-MS-MS fragments were applied to identify the structures. The results showed that 6 more discrepant constituents were existed between raw and carbonized Rubiae Radix et Rhizoma. Three constituents were selected as the main discrepant components according to the peak area (276 nm) and identified， as lucidin， xanthopurpurin and 1，3，6-trihydroxy-2-methylanthraquinone. After carbonized， contents of xanthopurpurin and 1，3，6-trihydroxy-2-methylanthraquinone were observably increasing， while lucidin was obviously decreasing. They could be used as the chemical markers for the differentiation between raw and carbonized Rubiae Radix et Rhizoma. The results of this experiment played an important role in the study of processing principle of carbonized Rubiae Radix et Rhizoma. It also provided important evidences for the interpretation of effective material based on carbonized Rubiae Radix et Rhizoma.
, 百拇医药
[Key words] Rubiae Radix et Rhizoma； carbonized Rubiae Radix et Rhizoma； UPLC-Q-TOF-MS； PCA； OPLS-DA
中藥茜草为茜草科植物茜草Rubia cordifolia L.的干燥根和根茎，味苦，性寒，归肝经，具有凉血、祛瘀、止血、通经的功效，临床上常用于吐血、衄血、崩漏、外伤出血、瘀阻经闭、关节痹痛、跌扑肿痛[1]。国内外对茜草的化学研究表明，茜草中主要含有蒽醌及其苷类、萘醌及其苷类，此外还含有环己肽类、多糖类、萜类等其他化学成分[2]。现代药理研究发现，茜草具有抗肿瘤、升高白细胞及免疫调节、护肝、抗炎抗风湿、抗氧化、止血等作用[3]。
茜草炭是由中药茜草经炒炭炮制而成，是中医临床常用化瘀止血药。余旭东等[4]比较了茜草与茜草炭饮片在抗炎、镇痛、活血化瘀、止血等方面药理作用的强弱，研究发现茜草炒炭后，抗炎、镇痛、活血化瘀等药理作用减弱，但止血作用增强。炒炭前后药理作用的变化必然由化学成分的变化引起。张振凌等[5]对茜草饮片炒炭前后化学成分的变化进行了研究，发现茜草在炒炭后大叶茜草素等化学成分减少的同时也有成分含量增加，提取分离鉴定为1，3-二羟基蒽醌(异茜草素)且有止血作用。单鸣秋等[6]利用UPLC对茜草炒炭前后1，3，6-三羟基-2-甲基蒽醌的含量进行了测定，研究发现炒炭后1，3，6-三羟基-2-甲基蒽醌的含量显著升高，为茜草炭的主要成分。但上述所研究均只针对单个成分在茜草炒炭前后发生的变化，不够全面，UPLC-Q-TOF-MS是近年来发展起来的具有高效分离和定性检测综合能力的分析方法，在中药化学成分分析等研究中已得到较多应用[7]。鉴于此，本研究拟采用该技术分析茜草炒炭前后化学成分的变化，并结合MarkerLynx XS软件进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)，以期探讨茜草炒炭前后化学成分的差异。, 百拇医药(陈毅 单鸣秋 王海丽 薛露 张丽 丁安伟)
[关键词] 茜草； 茜草炭； UPLC-Q-TOF-MS； PCA； OPLS-DA
[Abstract] In order to explore the effect on chemical constituents after carbonized， the changes of chemical constituents in raw and carbonized Rubiae Radix et Rhizoma were analyzed by UPLC-Q-TOF-MS. The research also used principal component analysis(PCA) and orthogonal partial least squares discriminant analysis(OPLS-DA) for data statistics to find out the main differences on components before and after carbonized. The accurate m/z values of Q-TOF-MS and Q-TOF-MS-MS fragments were applied to identify the structures. The results showed that 6 more discrepant constituents were existed between raw and carbonized Rubiae Radix et Rhizoma. Three constituents were selected as the main discrepant components according to the peak area (276 nm) and identified， as lucidin， xanthopurpurin and 1，3，6-trihydroxy-2-methylanthraquinone. After carbonized， contents of xanthopurpurin and 1，3，6-trihydroxy-2-methylanthraquinone were observably increasing， while lucidin was obviously decreasing. They could be used as the chemical markers for the differentiation between raw and carbonized Rubiae Radix et Rhizoma. The results of this experiment played an important role in the study of processing principle of carbonized Rubiae Radix et Rhizoma. It also provided important evidences for the interpretation of effective material based on carbonized Rubiae Radix et Rhizoma.
, 百拇医药
[Key words] Rubiae Radix et Rhizoma； carbonized Rubiae Radix et Rhizoma； UPLC-Q-TOF-MS； PCA； OPLS-DA
中藥茜草为茜草科植物茜草Rubia cordifolia L.的干燥根和根茎，味苦，性寒，归肝经，具有凉血、祛瘀、止血、通经的功效，临床上常用于吐血、衄血、崩漏、外伤出血、瘀阻经闭、关节痹痛、跌扑肿痛[1]。国内外对茜草的化学研究表明，茜草中主要含有蒽醌及其苷类、萘醌及其苷类，此外还含有环己肽类、多糖类、萜类等其他化学成分[2]。现代药理研究发现，茜草具有抗肿瘤、升高白细胞及免疫调节、护肝、抗炎抗风湿、抗氧化、止血等作用[3]。
茜草炭是由中药茜草经炒炭炮制而成，是中医临床常用化瘀止血药。余旭东等[4]比较了茜草与茜草炭饮片在抗炎、镇痛、活血化瘀、止血等方面药理作用的强弱，研究发现茜草炒炭后，抗炎、镇痛、活血化瘀等药理作用减弱，但止血作用增强。炒炭前后药理作用的变化必然由化学成分的变化引起。张振凌等[5]对茜草饮片炒炭前后化学成分的变化进行了研究，发现茜草在炒炭后大叶茜草素等化学成分减少的同时也有成分含量增加，提取分离鉴定为1，3-二羟基蒽醌(异茜草素)且有止血作用。单鸣秋等[6]利用UPLC对茜草炒炭前后1，3，6-三羟基-2-甲基蒽醌的含量进行了测定，研究发现炒炭后1，3，6-三羟基-2-甲基蒽醌的含量显著升高，为茜草炭的主要成分。但上述所研究均只针对单个成分在茜草炒炭前后发生的变化，不够全面，UPLC-Q-TOF-MS是近年来发展起来的具有高效分离和定性检测综合能力的分析方法，在中药化学成分分析等研究中已得到较多应用[7]。鉴于此，本研究拟采用该技术分析茜草炒炭前后化学成分的变化，并结合MarkerLynx XS软件进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)，以期探讨茜草炒炭前后化学成分的差异。, 百拇医药(陈毅 单鸣秋 王海丽 薛露 张丽 丁安伟)