刺老苞根皮含药血清对原代成骨细胞Wnt/βcatenin信号通路的影响(3)
经琼脂糖凝胶电泳，分析数据。26统计学分析实验数据使用SPSS 200软件进行数据分析处理。以±s表示，组间比较采用单因素方差分析，P<005为有统计学意义，P<001有显著统计学意义。
3结果
31原代成骨细胞的鉴定原代成骨细胞用成骨细胞完全培养基(含10%胎牛血清)在37 ℃，5%CO2恒温培养箱中培养。经倒置显微镜观察，细胞在24 h后开始贴壁，48 h后完全贴壁，细胞为单核，呈长梭形和多角形等形态，10 d左右细胞融合成铺路石样，并伴有矿化结节的出现，见图1。
32茜素红染色法检测骨矿化功能不同浓度含药血清对成骨细胞作用10 d后，经茜素红染色后，计数钙化结节的个数，结果显示：与对照组相比较，不同浓度含药血清组干预后的成骨细胞产生的钙化结节皆有所增多，低剂量组差异明显(P<005)，中剂量组和高剂量组差异显著(P<001)，见表2。
33Western blot检测βcatenin，Wnt1，Frizzled2，TCF和Axin的蛋白表达量经Western blot检测不同浓度含药血清对原代成骨细胞分化过程中不同细胞因子相对蛋白表达量的影响 ......
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