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编号:13088192
蛇类中药饮片分子鉴别方法的研究进展(2)
http://www.100md.com 2017年10月8日 《中国中药杂志》 2017年第15期
     目前,基因指纹图谱是对中药材进行质控的重要方法,RAPD技术可实现理想的分子标记。待测样品经随机引物扩增后,其PCR产物在凝胶电泳上可呈现出物种特有的DNA指纹图谱。研究者通过直接对比待测样品和标准品的DNA指纹图谱,即可鉴别药材的真伪。如通过基因组DNA电泳图谱和标准图谱的比对分析,对金钱白花蛇和乌梢蛇的混伪品具有良好的鉴别效果[5]。目前RAPD技术已经成功地运用于多种中药材以及其他动植物的遗传多样性分析和品种的鉴别中。RAPD技术在物种遗传多样性研究中,结合生物统计学,可实现物种的种属划分,达到鉴别的目的。如王义权等运用该技术研究了蛇类的种属亲缘关系[6]。

    RAPD技术的优点在于:①模板用量少,无需酶切、产物转移、探针杂交等繁琐的操作,简单易行;②含多个随机引物,标记的分子DNA序列多,可实现全基因组多态性分析;③实验条件没有严格的限制,如无需同位素标记、特异性引物设计。但是,近几年RAPD技术的研究逐渐减少,研究者鲜有单独使用RAPD技术研究物种DNA分子多态性。究其原因主要是该技术存在判定标准不同、有序列同源的干扰[7]、实验结果不具稳定性、重复性差[8]等不足。

    综合以上原因使RAPD的单独使用受到了严重的限制。因此 ......
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