225心肌ROS含量测定大鼠心尖组织进行冰冻切片，厚度10 μm。切片上滴加25 μmol·L-1的DCFHDA溶液，于37 ℃保湿盒中避光孵育20 min。PBS冲洗2遍后滴加2 mg·L-1的 DAPI溶液，暗室中常温孵育20 min。PBS冲洗2遍后，将切片置于荧光倒置显微镜下进行荧光激发，观察切片荧光强度及拍照，并采用ImagePro Plus图像分析软件分析荧光强度。

    226Western blot心尖组织称重后，按凯基胞浆/胞核蛋白提取试剂盒方法分别提取胞浆蛋白及胞核蛋白，胞浆蛋白用于胞浆Nrf2，Keap1，HO1及NQO1蛋白表达的测定，胞核蛋白用于胞核Nrf2蛋白表达的测定。BCA法测定各组蛋白样品的蛋白浓度并调至等蛋白浓度，沸水中煮5 min。蛋白样品进行SDSPAGE电泳，转膜，封闭，孵一抗(Nrf2抗体1∶1 200稀释；HO1抗体1∶15 000稀释；NQO1抗体1∶2万稀释；Keap1抗体1∶1 000稀释；βactin抗体1∶1 000稀释；H3抗体1∶1 000稀释)4 ℃过夜 ......