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编号:13101432
中药川贝母对哮喘模型小鼠MMP2,MMP9和TIMP1的影响(3)
http://www.100md.com 2017年11月1日 《中国中药杂志》 2017年第21期
     26肺组织MMP2,MMP9和TIMP1水平测定取约1/2右肺匀浆,采用ELISA测定肺组织MMP2,MMP9和TIMP1水平,严格按照ELISA试剂盒的操作说明进行操作。

    27RTPCR分析肺组织MMP2,MMP9和TIMP1 mRNA转录水平Trizol试剂提取剩余右肺组织总RNA,检测RNA纯度,按照RTPCR试剂盒进行反转录反应,合成单链的cDNA。cDNA 产物保存在-20 ℃。利用Pubmed查找相关基因序列,并利用引物合成软件Primer Premier 50设计引物。RTPCR 反应体系:体积为25 μL;反应程序为95 ℃变性45 s,60 ℃复性60 s,72 ℃延伸45 s,共30个循环,72 ℃再延伸7 min。每个样本以内参基因βactin调整。扩增产物在15%琼脂糖凝胶电泳后通过凝胶成像分析系统观察并保存图像。每份样品检测3次。引物序列见表1。

    28统计学方法采用SPSS 170软件进行描述性统计。计量资料用±s表示。多组间均数比较,采用Oneway ANOWA分析,组间两两比较,采用SNK法,当P<005为差异有统计学意义 ......
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