腺苷预处理对糖氧剥夺损伤星形胶质细胞的保护作用(2)
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。星形胶质细胞(Astrocyte，Ast)是中枢神经系统中数量最多的神经细胞，过去Ast仅被视为具有固定神经元的功能，对神经元起支持和营养作用。而现在人们逐渐认识到它在调节中枢神经系统功能中发挥着很关键的作用。本研究探讨腺苷预处理对糖氧剥夺损伤Ast的保护作用，揭示腺苷对神经系统的保护机制，为腺苷应用于临床治疗脑血管疾病奠定理论基础。
1 材料与方法
1.1 实验动物：出生24小时内的Sprague-Dewley(SD)大鼠，雌雄不限，体重约10-12g。由新乡医学院实验动物中心提供。
1.2 主要试剂及仪器：DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)高糖培养基、DMEM无糖培养基购于Gibico公司，胰蛋白酶粉、XTT、PMS购于Sigma公司，胎牛血清购于杭州四季青，兔抗人胶质纤维酸性蛋白GFAP多克隆抗体购于中杉金桥公司，FITC标记羊抗兔IgG购于博奥森公司，腺苷(Adension)购于Amresco公司；CO2恒温细胞培养箱(德国Heraeu公司)、Eclipse E200显微镜(日本Nikon公司)、BIO-TEK ELX800 酶标仪(美国宝特仪器有限公司)。
1.3 实验方法
1.3.1 星型胶质细胞的培养： 参照俞爱青
[5]的方法行体外SD大鼠星形胶质细胞培养：取材后利用机械分离法和差速贴壁法纯化培养Ast，接种密度为1×109L-1，根据细胞生长情况，2～3d半量换液1次。原代细胞培养至铺满瓶底约85%后，即可传代，传代细胞生长较快，一般5～7d即可再次传代，取第3代、第4代细胞进行免疫细胞胶质纤维酸性蛋白酶(glial fibrillary acidic protein ......
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