干细胞中支原体PCR检测方法的建立(2)
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3 讨论
一般在细胞培养的过程中,支原体污染的情况不容易被发现,因为支原体不像细菌污染一样可以在显微镜下或肉眼进行观察。但是支原体污染后会对细胞的生长,以及细胞内的基因表达及蛋白合成等反面均造成一定影响,这样就会对科研研究结果造成一定影响[4]。以前常用的方法是采用琼脂培养检测支原体,通过观察支原体的生长特征来判断细胞在培养过程中是否出现支原体污染的情况[5]。但是这种经典的方法所需的时间较长。对细胞培养过程中支原体污染检测的方法还有使用电镜检测、荧光染色、双酶分析法等,但这些方法的灵敏性较低,并且操作比较复杂,检测需要较高的费用。而PCR检测支原体方法是近几年得到应用的新检测方法,PCR检测操作简单,所需时间较短,并且具有很高的灵敏性。
本研究中,使用PCR检测干细胞中支原体污染情况比实验试剂盒检测的灵敏度高。并且检测结果显示,培养的时间越长,支原体污染的几率越大。所以在干细胞培养过程中,应该对长期培养的干细胞进行相应的处理,以防支原体污染。PCR方法可以很好的检测干细胞中支原体的存在情况。
对出现支原体污染的细胞的处理方法方法并不是很多 ......
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