论文下载：过敏性紫癜急性期的免疫状态(论著)

过敏性紫癜急性期的免疫状态

http://www.100md.com 2006年1月1日李文斌陈凤琴陈莉刘泽英王英荣薄慕琴尹娜

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    参见附件(176KB，2页)。

     【摘要】目的探讨HenochSchonlein purpura,HSP的免疫学发病机制。方法采用直接免疫荧光流式细胞分析技术，多克隆抗体单向免疫扩散法检测SHP患儿急性期外周血单个核细胞CD+4、CD-30/CD+4、CD+30、Th细胞亚群，血浆免疫球蛋白IgA、IgG、IgM浓度，采用SAS8.0统计软件进行分析。结果 (1)外周血单个核细胞Th1和Th2的含量：HSP组分别为(80.44±1.42)%和(19.56±1.42)%,对照组健康儿童为(89.73±0.52)%和(10.26±0.05)%，t检验P<0.05，显示与健康儿童相比HSP组外周血单个核细胞Th2含量明显较高而Th1含量明显降低。(2)血浆免疫球蛋白的浓度：HSP组IgA、IgG、IgM分别为(1.616±0.060)g/L、(1.551±1.157)g/L、(1.307±0.144)g/L，对照组健康儿童为(1.077±0.101)g/L、(10.597±1.283)g/L、(1.272±0.145)g/L，两组间IgA浓度t检验P<0.05，两组间IgG、IgM浓度T检验P>0.05，显示HSP患儿血浆IgA浓度显著高于正常对照组，血浆IgG、IgM与正常对照组差异无显著性。结论 HSP患儿急性期体内存在T细胞功能紊乱，Th1和Th2的失衡，Th2细胞优势活化。血浆免疫球蛋白IGA合成异常是产生免疫复合物血管炎的重要原因。

    【关键词】过敏性紫癜；辅助性T淋巴细胞；CD4；CD30；儿童；免疫球蛋白

    The immune state in children with HenochSchonlein purpura

    LI Wenbin,CHEN Fengqin,CHEN Li,et al.

    Department of Pediatrics,Hebei Provincial People's Hospital,Shijiazhang 050051

    【Abstract】 Objective To investigate the immunology outbreak mechanism of HenochSchonlein purpura (HSP).Methods 4 ml venous blood from the children with HSP and healthy subjects was collected,and the CD+4，CD-30，Th/CD+4，CD+30,Th cell subgroup and the plasma immunoglobulin IgA,IgG,IgM were detected by using the direct immunity fluorescence flow cytometry and polyclonal antibody immunodiffusion method respectively.All the data were analyzed with SAS 8.0 statistical software.Results (1) Th1 and Th2 content in patients with HSP was (80.44±1.42)% and (19.56±1.42)% respectively,which was (89.73±0.52)% and (10.26±0.05)% in healthy subjects.There was a significant difference between the two groups (P<0.05).The content of Th2 in patient with HSP was much higher,however the content of Th1 was much lower than those in healthy subjects.(2) The plasma immunoglobulin:the concentration of IgA,IgG,IgM in patients with HSP was (1.616±0.060) g/L,(1.551±1.157) g/L,(1.307±0.144) g/L respectively，which was (1.077±0.101) g/L,(10.597±1.283) g/L,(1.272±0.145) g/L in healthy subjects respectively，there was a significant difference in the concentrations of IgA between two groups (P<0.05),however there was no significant difference in IgG and IgM between two groups (P>0.05).Conclusion There is T cell function imbalance in children with HSP at acute period,there is a imbalance between Th1 and Th2,and Th2 cells are activated dominantly.The synthetic abnormality of plasma immunoglobulin IgA is the important cause of producing immune complex angiitis.

    【Key words】 HenochSchonlein purpura;helper T lymphocytes;CD4;CD30;children;immunoglobulin

    过敏性紫癜(henochschonlein purpura,HSP)是以小血管为主要病变的系统性血管炎，发病机制至今未明，近年来国内外无论临床还是基础研究主要通过检测IFNγ或IL4等细胞因子的含量来间接判断Th1和Th2的数量，而用流式细胞仪直接检测HSP患儿体内CD+4 CD-30 Th/CD+4 CD+30 Th细胞亚群实验报道甚少。本课题采用流式细胞仪分析技术检测SHP患儿急性期外周血单个核细胞经培养后CD+4 CD-30/CD+4 CD+30 Th细胞亚群，多克隆抗体单向免疫扩散法检测血浆免疫球蛋白IgA、IgG、IgM浓度，并与20例正常儿童相比较，以期阐明上述物质在SHP患儿发病中的变化，进一步探讨HSP的免疫学发病机制。

     1 资料与方法

    11 研究对象研究对象为2003年3月至2004年9月间在本院儿科住院的HSP患儿30例均符合美国风湿病协会制定的诊断标准[1]及同期进行健康查体的儿童。男19例，女11例；年龄4～16岁，其中4～8岁13例，～12岁12例，～16岁5例。两组观测对象在性别、年龄的分布上经统计学处理差异无显著性。所有病例取血检测时均未接受肾上腺皮质激素的治疗。

    12 标本的采集及处理 HSP患儿于入院后立即取股静脉或肘静脉血4 ml，其中2 ml进行血浆免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的检测，另2 ml加入含EDTA抗凝剂的试管中立即进行细胞培养。

    13 CD+4、CD-30、Th/CD+4、CD+30、Th细胞亚群的检测，分离淋巴细胞，荧光标记抗CD4、CD30染色T细胞,流式细胞仪可同时检测不同荧光，并进行计数。血浆免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的测定:采用本实验室常规使用的多克隆抗体单向免疫扩散法。

    14 统计学处理两组观测对象的CD+4、CD-30/CD+4、CD+30、Th细胞亚群、免疫球蛋白IgA、IgG、IgM值，经正态分布检验后，用均数±标准差(±s)表示。所有资料均采用SAS8.0统计软件进行分析。显著水平为α=0.05。

     2 结果

    21 外周血单个核细胞Th1和Th2的含量 HSP组分别为(80.44±1.42)%和(19.56±1.42)%, 对照组健康儿童为(89.73±0.52)%和(10.26±0.05)%，t检验P<0.05，显示与健康儿童相比HSP组外周血单个核细胞Th2含量明显较高而Th1含量明显降低。

    22 血浆免疫球蛋白的浓度 HSP组IgA、IgG、IgM分别为(1.616±0.060)g/L、(1.551±1.157)g/L、(1.307±0.144)g/L，对照组健康儿童为(1.077±0.101)g/L、(10.597±1.283)g/L、(1.272±0.145)g/L，两组间IgA浓度t检验P<0.05，两组间IgG、IgM浓度t检验P>0.05，显示HSP患儿血浆IgA浓度显著高于正常对照组，血浆IgG、IgM与正常对照组差异无显著性。

    3 讨论

    过敏性紫癜是儿童常见的自身免疫性系统性小血管炎[2]，近年研究发现HSP患儿存在免疫功能失调，本研究结果显示HSP组与健康儿童相比，Th2含量明显较高，而Th1含量明显降低。表明HSP患儿急性期体内存在Th1/Th2的失衡，主要为Th2的优势活化，是否由于免疫偏离所致，尚须进一步研究。CD30属肿瘤坏死因子(TNF)/神经生长因子(NGF)受体超家族成员，Th2细胞膜表达CD30并释放较多的可溶性CD30，CD30不仅是一个细胞表面标志，而且与Th2细胞功能有密切关系[3]。外周血单核细胞(PBMC)在正常情况下不表达CD30，而在某些病理状态下，可表达CD30，其中CD+4细胞占85%以上，激活的CD+4 Th2细胞可持续高表达CD30，而Th1和B细胞则完全不表达CD30[4，5]。近年来国内外无论临床还是基础研究主要通过检测IFNγ或IL4等细胞因子的含量来间接判断Th1和Th2的数量，而用流式细胞仪直接检测HSP患儿体内CD+4、CD-30、Th/CD+4、CD+30、Th细胞亚群实验报道甚少。本课题采用流式细胞仪分析技术检测SHP患儿急性期外周血单个核细胞经培养后CD+4、CD-30/CD+4、CD+30、Th细胞亚群，反映Th1和Th2的含量。HSP是Th2占优势反应的疾病，HSP患者Th1细胞因子降低，可能是Th2细胞在疾病发展中的结果。有研究表明HSP患儿PBMC表达CD30的阳性细胞率显著高于对照组正常儿童，由于PBMC中许多细胞均表达CD30，因此用CD+4、CD+30细胞代表Th2细胞来研究Th1/Th2的平衡可能更有重要的临床意义。本研究结果还显示HSP患儿血浆IgA浓度显著高于正常对照组，血浆IgG、IgM与正常对照组差异无显著性。说明HSP患儿体内存在明显的体液免疫功能异常。近几年的研究发现，HSP患儿血中IgA，包含IgA的免疫复合物(CIC)增高，皮肤、内脏血管壁中常见明显的IgA沉着，本病中的IgA主要为多聚IgA。本实验发现HSP患儿肾脏明显受累出现紫癜性肾炎者，血浆IgA较非紫癜性肾炎者明显升高，但因例数较少，无法进行统计学分析，有待进一步深入研究。总之，HSP是一种原因不明白细胞破碎性血管炎,Th2细胞亚群优势活化及血浆免疫球蛋白IgA合成增加，近几年，Th细胞分化机制研究迅速，已认识到TCR活化信号、辅助受体以及细胞因子环境等因素共同介导了Th1/Th2细胞的分化方向，并逐步深入到转录因子、信号转导、基因调控水平。还存在Th细胞分化的复杂性、调节的准确性以及信号通路和相关因子的交叉性等问题。

     参考文献

    1 Mills JA,Michel BA,Bloch DA,et al.The American college of rheumatology 1990 criteria for the classification of HenochSchonlein purpura.Arthritis Rheum,1990,33:11141121.

    2 刘洪玉，刘江林，石世同.腹型过敏性紫癜98例分析.河北医药，2004，26：429.

    3 Del Prete G,De Carli M,D'Elios MM,et al.CD30mediated signaling promotes the development of human T helper type 2like T cells.J Exp Med，1995，182:16551661.

    4 王黎玲.小剂量免疫球蛋白治疗难治性过敏性紫癜.实用儿科临床杂志,1998,13:248249.

    5 许伟,卢思广,薛天阳.静脉滴注丙种球蛋白治疗重症过敏性紫癜疗效观察.临床儿科杂志,2002，20：236237.

    作者单位： 050071 石家庄市，河北省人民医院儿童急救中心(李文斌、陈凤琴、刘泽英、王英荣、薄慕琴、尹娜)；河北省血液中心(陈莉)

http://www.100md.com/html/paper/1002-7386/2006/01/06.htm

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