张云虹

    人乳头状瘤病毒(human papillomavirus，HPV)是一种高度特异性的嗜上皮性病毒，属双链闭环的小DNA病毒，它由蛋白衣壳这层外衣和被包裹着的核心构成。我国是食管癌高发区，食管癌居我国癌症死因的第四位，食管癌的发生发展和许多因素有关系，近年来HPV感染和食管癌的发生之间关系的研究越来越受到重视。本文通过免疫组化SP法检测HPV和P53在60例食管癌及其癌旁组织中的表达情况，来探讨HPV感染在食管癌和癌旁组织中的不同及与P53表达的相关性。

    1 材料与方法

    1.1 标本来源 选择2009年9月至2011年9月河北省衡水市第二人民医院病理科存档食管癌石蜡标本60例，常规4%中性甲醛固定，石蜡包埋，4 μm切片，采用福州迈新生物有限公司的金·多聚赖氨酸粘附玻片行免疫组化。60例食管癌均为鳞状细胞癌，其中有17例发生淋巴结转移。

    1.2 主要试剂 (1)鼠抗人人乳头状瘤病毒(广谱)单克隆抗体，克隆号BPV-1/1H8+CAMVIR，由上海太阳生物技术有限公司提供;(2)鼠抗人P53蛋白免疫组化单克隆抗体，克隆号DO-7，由福州迈新生物有限公司提供。

    1.3 免疫组化实验 主要步骤:(1)石蜡切片常规脱蜡、水化;(2)柠檬酸盐抗原修复液高温修复;(3)滴加过氧化物酶阻断剂;(4)滴加正常非免疫动物血清;(5)滴加第一抗体;(6)滴加生物素标记的第二抗体;(7)滴加链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶试剂;(8)DAB显色剂显色 ......