冯志山 赵梦川 王乐 李贵霞 陶曙光 温琳琳 王琨 马学军

    ·论著·

    GeXP多重分析技术对四氢叶酸还原酶基因多态性与先天性心脏病相关性的研究

    冯志山 赵梦川 王乐 李贵霞 陶曙光 温琳琳 王琨 马学军

    目的 利用GeXP多重分析技术，探讨四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)多态性与先天性心脏病相关性。方法 收集2013年2月至2014年12月河北省儿童医院心脏外科手术的261例先心病患儿及49例健康对照儿童外周血，提取全血DNA，使用GeXP多重测序平台的多重分析技术对其MTHFR基因上的两个易感位点rs1801131和rs1801133进行基因分型，采用SPSS 16.0软件的χ2检验，分析先心病与MTHFR基因多态性的相关性。结果 GeXP多重测序平台可同时测量2个SNP的四种基因型，先心病组与对照组MTHFR677C/T等位基因和基因型频率差异无统计学意义(χ2=0.853，P=0.356；χ2=0.898，P=0.343)。结论 GeXP多重分析平台是筛查先心病易感基因特异性良好、操作简便的多重分析技术，本研究入选的先心病患儿与健康对照MTHFR等位基因或其基因型分布无显著性差异，为后期大样本量探寻先心病发病易感基因起到启示作用和奠定了方法学基础。

    先天性心脏病；亚甲基四氢叶酸还原酶；儿童

    先天性心脏病(先心病)是一种严重威胁儿童健康的出生缺陷[1,2]，发病率6%～9%，每年将有10多万先心病患儿出生，也是造成孕期流产、死胎的主要原因，给家庭和社会带来沉重负担[3]。先心病病因尚未完全阐明，但多数学者认为，少数是单基因突变和染色体畸变引起，大多数是由遗传和环境因素相互作用引起的多基因遗传病[4]。针对先心病易感基因已开展大量研究，仍有约3/4的患者致病基因不明[5]，因此，寻找先心病相关基因、易感基因十分必要。本研究使用前期建立的一种简便快捷、特异性强、可同时检测多个单碱基突变和单核苷酸多态(single nucleotide polymorphisms,SNP)位点的GeXP多重检测方法，对261例先心病患儿和49例健康儿童亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因上的两个易感位点rs1801131和rs1801133进行基因分型，分析先心病与MTHFR基因多态性的相关性，筛选先心病发病相关基因。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 选择2013年2月至2014年12月在河北省儿童医院心脏外科确诊的261例先心病患儿(先心病组)，所有入选患儿均经术前超声心动图和术中确认先心病类型及其严重程度；其中单纯型先心病186例 ......