吴军 尚瑞

    ·论著·

    龙胆水提物对急性胰腺炎大鼠肝损伤的保护作用及机制研究

    吴军 尚瑞

    目的 探讨龙胆水提物对急性胰腺炎(AP)大鼠肝损伤的保护作用及机制。方法 SD大鼠40只随机分为正常组(n=8)与模型组(n=32)，模型组采用经十二指肠乳头逆行胆胰管注射5%牛黄胆酸钠方法制备AP大鼠模型，造模后大鼠分为4个亚组：模型对照组(n=8)、龙胆水提物12mg/kg组(n=8)、24mg/kg组(n=8)、48mg/kg组(n=8)，龙胆水提物低、中、高剂量组每天分别灌胃给予龙胆水提物12mg/kg,24mg/kg及48mg/kg,正常组和模型对照组给予等体积的0.9%氯化钠溶液，连续给药1周，1次/d。给药结束后颈总动脉取血，分离血清，检测血清ALT、AST、AMY、IL-6、TNF-α水平，大鼠脱颈椎处死后剪取肝右叶1/2,于4%中性甲醛固定,HE染色观察肝脏结构变化，westernblot检测肝脏组织NF-κβ及I-κB表达水平。结果 与模型对照组比较，龙胆水提物24mg/kg及48mg/kg组血清ALT、AST、AMY水平及IL-6及TNF-α表达水平显著降低(P1 材料与方法

    1.1 实验动物 SPF级大鼠40只，雄性，体重250～300 g (武汉大学实验动物中心提供)，许可证号：SCXK(鄂)2014-1254。

    1.2 药物 龙胆(批号：160307812)，购于康源药业股份有限公司，由湖北中医学院李明副教授鉴定为龙胆科植物龙胆正品(Gentianascabra Bunge)。

    1.3 试剂及仪器 牛横胆酸钠(美国sigma公司，批号：160125)；ALT、AST、AMY、IL-6、TNF-α试剂盒均购自南京建成生物工程有限公司，批号分别为20160520、20160625、20160515、20160605、20160320;兔抗大鼠NF-κβ多克隆抗体、兔抗大鼠I-κB多克隆抗体及兔抗大鼠GAPDH多克隆抗体均购自美国sigma公司，批号分别为160302、160521、160425；KDC-220HR高速冷冻离心机(科大创新股份有限公司);多功能酶标仪(美国铂金埃尔默有限公司);Forma -85℃冰箱(美国Thermo公司);静脉微量注射泵(浙大医学仪器厂)。

    1.4 方法

    1.4.1 龙胆水提物制备:称取龙胆2 kg，加10倍体积水浸泡12 h后回流提取3次 ......