符泰胜 刘春勇

    骨肉瘤是一种原发的骨恶性肿瘤，其恶性程度高、转移早、预后差，靶向治疗是可直接靶向特定位点提高肿瘤局部治疗效果，同时减少对健康组织的毒性反应，部分靶向药物在骨肉瘤的临床应用中已经取得一定疗效，寻找开发更多的靶点和靶向药物对骨肉瘤的靶向治疗具有重要意义[1,2]。研究表明，lncRNA对miRNA具有海绵吸附作用，可作为一种竞争性的内源性RNA与miRNA相互作用，共同参与靶向基因的调控，从而参与肿瘤发生发展过程[3]。癌症易感基因19(cancer susceptibility 19，CASC19)是一种lncRNA，结直肠癌组织中CASC19高表达，其与肿瘤的大小、淋巴结转移及远处转移显著相关[4]。CASC19过表达通过靶向miR-140-5p上调细胞迁移诱导透明质酸酶1(cell migration inducing hyaluronidase 1，CEMIP)增强了结直肠癌细胞的侵袭，迁移和增殖[5]。研究发现，骨肉瘤组织中miR-152低表达，与Enneking分期、转移相关，是影响骨肉瘤患者预后的独立危险因素[6]。miR-152-3p通过靶向调控转录因子4(transcription factor 4，TCF4)抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖并诱导细胞凋亡[7]。LINC00174通过使miR-1523-3p海绵化并增加溶质载体家族2促葡萄糖转运蛋白成员1(solute carrier family 2/facilitated glucose transporter,member 1，SLC2A1)表达促进神经胶质瘤的癌变[8]。研究报道miR-490-3p通过靶向高迁移率族蛋白A2(high mobility group protein AT-hook2，HMGA2)能显著抑制骨肉瘤细胞增殖，诱导细胞凋亡[9]。miR-106a-5p上调可通过靶向骨肉瘤细胞中的HMGA2抑制细胞增殖，迁移和侵袭[10]。然而CASC19对骨肉瘤发生发展的应收及其机制尚不清楚，本实验旨在研究CASC19是否通过调控miR-1523-3p/HMGA2影响骨肉瘤的发生发展。

    1 材料与方法

    1.1 细胞与主要试剂 人成骨细胞hFOB 1.19和骨肉瘤细胞Saos2、U2OS、HOS购自美国ATCC；胎牛血清、DMEM-F12培养基、RPMI-1640培养基均购自美国Gibco公司；Trizol试剂、反转录试剂盒、荧光定量试剂盒购自美国Progema公司；载体质粒购自上海吉玛制药技术有限公司；LipofectamineTM2000转染试剂购自美国Invitrogen公司；细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8 ......