杨富兰

    由于胰腺癌的早期症状不明显，因此绝大多数患者在诊断时已处于晚期，胰腺癌的高转移潜力是影响胰腺癌预后不良的重要因素，因此，对胰腺癌转移的分子机制进行分析是开发新治疗方法的基础[1]。微小RNA(microRNA，miRNA)在肿瘤的发生和发展中起重要作用，研究显示miR-625可通过靶向抑制其靶基因的表达在乳腺癌中发挥抑癌作用[2]。长非编码RNA(long non-coding RNA，LncRNA)是一类长度>200个核苷酸、不具有蛋白质翻译功能的长链RNA。LncRNA可以通过靶向miRNA调节信使RNA(message RNA，mRNA)降解和翻译[3]。LINC01133是新发现的一种具有促癌作用的LncRNA，在肺癌中，LINC01133水平升高并且可能与患者不良预后有关，提示LINC01133具有促进肿瘤发展的作用[4]。G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1，CCND1)是调控细胞增殖的重要蛋白，有研究结果也显示CCND1具有促进肿瘤细胞迁移和侵袭的作用[5]。本文分析LINC01133通过靶向miR-625调控CCND1促进胰腺癌细胞迁移、侵袭的机制。

    1 材料与方法

    1.1 主要材料与仪器 人胰腺癌细胞系SW1990(ATCC公司，美国)。DMEM培养基(Invitrogen公司，美国)。LINC01133和CCND1过表达质粒和miR-625类似物(mimic)以及相应的阴性对照(negative control，NC)(Thermo Fisher公司，美国)。Lipofectamine 2000(Invitrogen公司，美国)。双荧光素酶报告试剂盒和相应的1000 System荧光检测仪(Promega公司，美国)。细胞计数试剂盒-8(Cell Counting Kit-8，CCK-8)试剂盒(Beyotime生物技术研究所，中国)。Transwell小室(BD Biosciences公司，美国)。PCR引物由Genewiz公司(中国)设计和合成。Trizol试剂(Invitrogen公司，美国)。逆转录cDNA试剂盒和SYBR Green PCR Master Mix qPCR试剂盒(Roche公司 ......