敬聪 丁向前 王君 邹杨鸿 王志刚 余化霖 耿鑫

    神经胶质瘤是颅内肿瘤中最常见的恶性肿瘤。神经系统恶性肿瘤中，胶质瘤约占80%，目前最常见的治疗方法是手术切除、放疗、化疗[1]。高级别恶性胶质瘤在成人原发性脑肿瘤中最常见，通过外科手术、放化疗等积极治疗，1年和5年生存率分别为30%和13%[1]。胶质母细胞瘤的侵袭程度最高，确诊后患者仅有15个月左右的的中位生存期，5年生存率为也仅为6.8%[2]。而引起这个结果的原因是胶质瘤细胞具有高度侵袭性，使得外科手术难以完整切除胶质瘤肿瘤组织；同时，由于胶质瘤的生物学特性复杂，对常规放、化疗不敏感，导致治疗效果极差，常容易复发[1]。手术切除后，大部分患者在手术切缘2～3 cm内复发，因此，需要探索一些新的治疗方法。通过对胶质瘤细胞的培养及实验，可以从从分子、基因等水平等揭示胶质瘤的生物学特性。神经瘤细胞体外培养技术在肿瘤研究方面具有很多独特的优势，在神经科学研究中占据重要地位。但神经细胞体外培养条件要求高、难度极大又制约了其发展。因为胶质细胞瘤具有高度异质性，在肿瘤内部的不同细胞以及肿瘤微环境之间具有复杂的相互作用，因此，我们需要找到一个最佳的培养条件，保持分子基因型和表型以及原始肿瘤在体外和体内的异质性。下面本文回顾常见胶质瘤细胞体外培养技术及胶质瘤细胞培养在常用研究中的应用作一综述。

    1 细胞来源

    细胞培养为研究过程中维护细胞提供了体外环境，许多培养技术可用于肿瘤和非肿瘤细胞的生长和维护。选择合适的细胞来源和体外试验的细胞培养程序与试验本身同样重要[3]。

    1.1 经典细胞系 胶质瘤的细胞多来自人类和大鼠胶质瘤的细胞株，经典的细胞系如U87MG、U251、U6和T98G等，培养在含有血清的培养基中，随着传代次数的增加，其细胞在表型和基因型上与原发性肿瘤存在差异。尽管血清培养的神经胶质瘤细胞可以随着传代次数的增加显示出潜在的致癌能力，但它却不能反映亲本肿瘤的表型[4]。许多目前可用的胶质瘤细胞株缺乏与肿瘤类型、分级、位置、患者年龄等相关的临床信息，因此难以将研究结果与患者病情和临床病程相联系[3]。由于这些原因，传统建立的细胞系不能提供可靠的模型系统来了解胶质瘤的机制和治疗的相互作用。

    1.2 患者来源的细胞系 由于胶质瘤细胞原代培养因成功率较低，因此过去大多数研究人员未采用原代培养。随着培养技术的进步，如今，研究人员更喜欢从原代细胞培养，而不是使用已建立的细胞株，因为它们具有更高的生物学和表型相关性[3]，更适合用于侵袭性、敏感性等基础实验，其结果更能接近人体的真实情况 ......