E3B1在MCF-7细胞中的定位研究
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E3BI是以EPS8的SH3模序为诱饵筛选人胚胎纤维母细胞M426表达文库鉴定的3.2 Kb的全长eDNA序列,命名为E381即eps8-SH3结构域结合蛋白1,编码480aa的蛋白。E381的SH3和PR结构域能与细胞内多种蛋白结合,赋予E3BI广泛的生物学活性,E381最初鉴定的时候被认为是一种胞浆蛋白,而我们又采用hERR a l I-IBD为诱饵,利用酵母双杂从人乳腺eDNA文库中筛选到该基因,表明E381可以和hERRa!HBD相互结合m。但是E381与hERRo]的结合在动物细胞内是否也存在?因为hERR a 1作为核受体应该在细胞核发挥作用,E381是一种胞浆蛋白,它能否进入细胞核与hERRa l结合发挥作用。因此.我们将E381与绿色荧光蛋白融合构建到表达质粒上,通过基因转染.来观察E381在细胞内定位情况,验证E3BI能否定位于细胞核。
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