纸片法和发酵法检测餐具大肠菌群结果比较
关键词：大肠菌群；纸片法；发酵法
中图分类号：R12 文献标识码：B 文章编号：1004-7484(2012)06-0279-02
《中华人民共和国食品安全法》对餐具消毒明确规定：餐(饮)具和盛放直接入口食品的容器使用前应当洗净、消毒,用后应当洗净,保持清洁[1]。所以加强餐具监测及评价、公布餐具卫生状况、正确引导科学消费已成为监督监测工作的重要任务[1]。在餐具大肠菌群检测工作中大肠菌群快速检测纸片法(以下简称纸片法)具有用材简单，操作方便，且出结果快(18h)等优点，所以自1994年被正式列入国标检测方法[2] 以来，在餐具大肠菌群检测工作中得到广泛使用。但我们在长期检测实践中也发现该方法存在个别结果不易判别的不足。为保证餐具大肠菌群检测结果准确性，我们在2011年对我县大，中，小餐馆随机抽取的消毒后餐具检测时，用纸片法和发酵法同时对360份送检的餐具样本进行检测，结果如下。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1试剂
大肠菌群食(饮)具快速检测纸片(南京三爱实业有限公司研制，中国疾病预防控制中心营养与食品安全所监制)。
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)北京陆桥公司。
绿乳糖胆盐肉汤(BGLB)北京陆桥公司。
灭菌滤纸片(5cm*10cm)本实验室制备。
所有试剂均在有效期内使用。
1.1.2 样本
从我县大，中，小餐馆随机抽取的消毒后餐具 360份。
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1.2 方法
按GB14934-1994[1]中纸片法和发酵法同时进行检测。
1.2.1 纸片法
每份餐具样品贴纸片两张，每张纸片面积25cm2(5cm×5cm)，用无菌生理盐水润
湿大肠菌群检测用纸片后，立即贴于待检餐具内侧表面，30s后无菌操作取下，置于无菌塑料袋内;将采好样的纸片置37℃条件下培养18h，若纸片保持紫蓝色不变为大肠菌群阴性，纸片变黄并在黄色背景上呈现红色斑点或片状红晕为阳性。
1.2.2 发酵法
将制备好的灭菌滤纸片(5cm*10cm)2张用无菌生理盐水润湿后紧帖于待检餐具，1分钟后取滤纸片置入50ml无菌生理盐水试管中，充分振荡后制成原液。按GB/T4789.3-2008[2] 进行样品检验。检验结果大肠菌群<3个/100cm2为合格，否则判定为不合格。
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2 结果
2.1 用以上两种方法同时对360份样品的大肠菌群进行检测，大肠菌群合格率纸片法为89.4%，发酵法为88.3%。经卡方检验[3]，两种方法结果无显著差异(χ2=0.1125，P>0.5)。见表1
表1纸片法和发酵法检测餐具大肠菌群结果(单位：份)
2.2在发酵法检出的42份不合格样品中，有4份用纸片法检测为合格;而纸片法检出的38份不合格样品，用发酵法检测也均为不合格。见表2
表2纸片法和发酵法检测结果比较(单位：份)
3 讨论
3.1 两种方法检测结果无显著差异，不合格样品符合率达90.5%。但发酵法方法繁琐，用时较长，不适应快速检测的需要,而纸片法具有操作简便，基本不需要试剂，能够提高检测效率等优点[4]。
, http://www.100md.com
3.2 从表2结果可以看出，纸片法在检测过程中有假阴性，所以在实际检测工作中，纸片法若出现结果断定不确定或没有明显的合格不合格指标时，应该用发酵法进行复检，以保证检测结果准确可靠。另外有文献报道[5]，纸片法检测显色与餐具的洗涤方式、消毒剂的残留及采样时用生理盐水的多少有关，因此，用纸片法进行餐具大肠菌群检测时，一定要了解餐具的消毒、洗涤方式，并规范进行采样和培养操作。
参考文献
[1] GB 14934～1994.食(饮)具消毒卫生标准[S]，1994.
[2] GB/T4789.3～2008.食品卫生微生物学检验标准方法大肠菌群计数[S]，2008.
[3] 王树勤，卫生统计学[M]，北京，人民卫生出版社，1985，82～91.
[4] 陈茂义，纸片法检测大肠菌群结果判断的实验研究 [J]. 中国卫生检验杂志，2003，13(4)，438～439.
[5] 林凤，纸片法与发酵法检测食具大肠菌群的实验研究 [J]. 中国卫生检验杂志，2006，16(6)，696～697., 百拇医药(谢桂芳)
中图分类号：R12 文献标识码：B 文章编号：1004-7484(2012)06-0279-02
《中华人民共和国食品安全法》对餐具消毒明确规定：餐(饮)具和盛放直接入口食品的容器使用前应当洗净、消毒,用后应当洗净,保持清洁[1]。所以加强餐具监测及评价、公布餐具卫生状况、正确引导科学消费已成为监督监测工作的重要任务[1]。在餐具大肠菌群检测工作中大肠菌群快速检测纸片法(以下简称纸片法)具有用材简单，操作方便，且出结果快(18h)等优点，所以自1994年被正式列入国标检测方法[2] 以来，在餐具大肠菌群检测工作中得到广泛使用。但我们在长期检测实践中也发现该方法存在个别结果不易判别的不足。为保证餐具大肠菌群检测结果准确性，我们在2011年对我县大，中，小餐馆随机抽取的消毒后餐具检测时，用纸片法和发酵法同时对360份送检的餐具样本进行检测，结果如下。
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1 材料与方法
1.1材料
1.1.1试剂
大肠菌群食(饮)具快速检测纸片(南京三爱实业有限公司研制，中国疾病预防控制中心营养与食品安全所监制)。
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)北京陆桥公司。
绿乳糖胆盐肉汤(BGLB)北京陆桥公司。
灭菌滤纸片(5cm*10cm)本实验室制备。
所有试剂均在有效期内使用。
1.1.2 样本
从我县大，中，小餐馆随机抽取的消毒后餐具 360份。
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1.2 方法
按GB14934-1994[1]中纸片法和发酵法同时进行检测。
1.2.1 纸片法
每份餐具样品贴纸片两张，每张纸片面积25cm2(5cm×5cm)，用无菌生理盐水润
湿大肠菌群检测用纸片后，立即贴于待检餐具内侧表面，30s后无菌操作取下，置于无菌塑料袋内;将采好样的纸片置37℃条件下培养18h，若纸片保持紫蓝色不变为大肠菌群阴性，纸片变黄并在黄色背景上呈现红色斑点或片状红晕为阳性。
1.2.2 发酵法
将制备好的灭菌滤纸片(5cm*10cm)2张用无菌生理盐水润湿后紧帖于待检餐具，1分钟后取滤纸片置入50ml无菌生理盐水试管中，充分振荡后制成原液。按GB/T4789.3-2008[2] 进行样品检验。检验结果大肠菌群<3个/100cm2为合格，否则判定为不合格。
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2 结果
2.1 用以上两种方法同时对360份样品的大肠菌群进行检测，大肠菌群合格率纸片法为89.4%，发酵法为88.3%。经卡方检验[3]，两种方法结果无显著差异(χ2=0.1125，P>0.5)。见表1
表1纸片法和发酵法检测餐具大肠菌群结果(单位：份)
2.2在发酵法检出的42份不合格样品中，有4份用纸片法检测为合格;而纸片法检出的38份不合格样品，用发酵法检测也均为不合格。见表2
表2纸片法和发酵法检测结果比较(单位：份)
3 讨论
3.1 两种方法检测结果无显著差异，不合格样品符合率达90.5%。但发酵法方法繁琐，用时较长，不适应快速检测的需要,而纸片法具有操作简便，基本不需要试剂，能够提高检测效率等优点[4]。
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3.2 从表2结果可以看出，纸片法在检测过程中有假阴性，所以在实际检测工作中，纸片法若出现结果断定不确定或没有明显的合格不合格指标时，应该用发酵法进行复检，以保证检测结果准确可靠。另外有文献报道[5]，纸片法检测显色与餐具的洗涤方式、消毒剂的残留及采样时用生理盐水的多少有关，因此，用纸片法进行餐具大肠菌群检测时，一定要了解餐具的消毒、洗涤方式，并规范进行采样和培养操作。
参考文献
[1] GB 14934～1994.食(饮)具消毒卫生标准[S]，1994.
[2] GB/T4789.3～2008.食品卫生微生物学检验标准方法大肠菌群计数[S]，2008.
[3] 王树勤，卫生统计学[M]，北京，人民卫生出版社，1985，82～91.
[4] 陈茂义，纸片法检测大肠菌群结果判断的实验研究 [J]. 中国卫生检验杂志，2003，13(4)，438～439.
[5] 林凤，纸片法与发酵法检测食具大肠菌群的实验研究 [J]. 中国卫生检验杂志，2006，16(6)，696～697., 百拇医药(谢桂芳)