卵巢癌CYP1B1免疫组化诊断试剂的初步应用
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【摘要】 CYP1B1在上皮性卵巢癌中中特异性高表达，而在正常组织中不表达或表达量极低，以 CYP1B1 为靶点研制肿瘤组织CYP1B1表达的免疫组化检测试剂盒，并初步应用于卵巢癌组织CYP1B1表达的检测，为肿瘤的诊断和治疗提供新的指标和依据。
【关键词】 CYP1B1；免疫组化；卵巢癌
文章编号：1004-7484(2013)-10-5542-02
1 材料与方法
1.1 实验材料 雌性健康家兔及上皮卵巢癌石蜡包埋组织
1.2 实验试剂 福氏完全佐剂、不完全佐剂，羊抗兔IgG-AP PBS磷酸盐缓冲液，兔抗CYP1B1多克隆抗体，显色系统/HRP试剂盒K5007
1.2.1 免疫血清的制备 将10mg偶联有载体的抗原溶于4ml生理盐水中，取2ml已溶解的抗原和福氏完全佐剂进行乳化；剩下的2ml抗原与等量不完全福氏佐剂进行乳化。将制得的乳剂滴于冰水上5-10min内完全不扩散为止，对家兔进行免疫时，先在家兔背部及皮下多点注射完全福氏佐剂，共注射注射0.5ml。以后每隔7-10天将完全福氏佐剂乳化的抗原注射至两肩后侧，每侧注射0.5ml，共2-3次。间隔10天后，用福氏不完全佐剂进行腹腔内强化免疫，末次加强免疫后取血清。
1.2.2 免疫血清的纯化及效价测定 取自制免疫兔血清，用盐析法粗提纯化分装后，-20℃保存备用。
对免疫血清抗体效价进行测定时，用0.1mol/L的碳酸盐缓冲液冲作为包被缓冲液将生物素标记的CYP1B1抗原浓度稀释为50μg/ml，包被链亲和素包被平板，每孔100μL ......
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