阿拉瑞林对人子宫内膜癌裸鼠移植瘤的抑制作用(1)
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2010年1月1日
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【摘要】目的 观察阿拉瑞林对HEC-1B裸鼠移植瘤的抑制作用及对Bcl-2、Bax表达的影响。方法 将HEC-1B荷瘤鼠随机分为4组:对照组、化疗组、阿拉瑞林组和联合组。30天后处死裸鼠,称取移植瘤重量,观察抑瘤率,免疫组化SABC法检测移植瘤Bcl-2、Bax的表达。结果 阿拉瑞林组抑瘤率为16.9%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),免疫组化结果显示,各治疗组Bcl-2的表达水平明显下降,Bax的表达水平明显上调。结论 阿拉瑞林有一定的抑制子宫内膜癌生长的作用,可能通过对Bcl-2、Bax的表达调控来实现,且与5-Fu有协同作用。
【关键词】子宫内膜癌阿拉瑞林移植瘤裸鼠Bcl-2Bax
【中图分类号】R246.3【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2010)01-00-02
【Abstract】ObjectiveThis study is to observe the effect of alarelin Decoction in inhibiting the growth of transplanting HEC-1B cells in nude mice and the expression of Bcl-2、Bax. Methods : Nude mice with transplanted HEC-1B tumor were randomly divided into four groups: control group, 5-Fu treated group , alarelin treated group, 5-Fu plus alarelin treatedgroup. At day 30 after treatment, the nude mice were executed, then the tumor was weighed, The inhibitive rates of the tumor in nude mice was observed and immunohistochemistry withSABC staining method were used to detect the expression ofBcl-2、Bax. Results: The inhibitive rates of the tumor in alarelin treated group was 16.9%,theaverage tumor weight had significant difference with that in control group(P<0.01); The Bcl-2 expression determined by immunohistochemical staining was down-regulated , but the Bax expression up-regulated after treatment.Conclusionsalarelin has good effect in inhibiting the growth of endometrial cancerby regulating Bcl-2、Bax expression and enhance the anti-tumor effect of 5-Fu.
【Key words】endometrial cancer; alarelin; xenograft; nude mice;Bcl-2;Bax.
子宫内膜癌是原发于子宫内膜的一组上皮性恶性肿瘤,占女性生殖系统最常见恶性肿瘤的20%～30%,近些年发病率不断上升。子宫内膜癌的治疗早期以手术为主,但晚期、复发性及年轻要求保留生育能力的患者,以激素及化疗等姑息治疗为主[1],现有的化疗单药或联合用药方案不良反应大、疗效不佳是其主要缺点。阿拉瑞林是人工合成的促性腺激素释放激素(gonadotrop in-releasing hormone, GnRH)九肽类似物,其药效是母体的15倍[2]。本研究通过观察阿拉瑞林对子宫内膜癌的促凋亡作用,探讨可能的分子机制,为子宫内膜癌提供新的治疗方法。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 动物及细胞株 BALB/C nu/nu裸鼠,4～6周龄,雌性,体重18～20g购于北京维通利华实验动物技术有限公司,合格证号:SCXK(京)2007-0001,SPF级环境饲养;人子宫内膜癌细胞株HEC-1B购自中国医学科学院上海研究所。
1.1.2 药物与试剂 阿拉瑞林购自安徽丰原制药有限公司马鞍山制药厂;5-氟尿嘧啶购自上海旭东海普药业有限公司;bcl-2、bax试剂盒为武汉博士德生物工程有限公司产品;SABC免疫组化染色超敏试剂盒,DAB 染色试剂盒,均购自福州迈新生物技术开发公司。
1.2 实验方法
1.2.1 细胞培养及动物模型的建立。 HEC-1B细胞株用含10%胎牛血清、100u/ml庆大霉素的DMEM培养基培养。常规培养于含5%CO2的37℃培养箱中,用0.25%胰酶消化传代继续培养。取对数生长期的细胞,在超净工作台内以TB空针接种于裸鼠右前肢近腋窝处皮下,每只注射0 ......
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