测量胆红素出现负值的原因分析
【关键词】胆红素；测量；分析
【中图分类号】R446.1 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2012)11-0406-02
胆红素是老化的红细胞中的血红蛋白的代谢产物，血液中总胆红素和直接胆红素的含量测定有利于肝病和黄疸病的诊断[1]。直接胆红素增加常见于阻塞性黄疸和肝细胞性黄疸[2]，总胆红素增高见于：中毒性或病毒性肝炎、溶血性黄疸、恶性贫血、阵发性血红蛋白尿症、红细胞增多症、新生儿黄疸、内出血、输血后溶血性黄疸、急性黄色性肝萎缩、先天性胆红素代谢异常、果糖不耐受等，以及摄入水杨酸类、红霉素、利福平、孕激素、安乃近等药物[3]。最近本人在胆红素测定过程中发现在质控物和样本测定中总有负值出现，现将处理过程总结如下：
1临床资料
所用仪器为迈瑞Bs-300全自动生化仪，试剂为北京华亿亿康公司提供，质控品为朗道多值质控品。反应参数为：测定方法为终点法，反应方向为下降，主波长为450纳米，样本量为14微升，试剂1为280微升，试剂2为70微升，线性限20，孵育时间25，反应时间-1到25.质控品按要求配制和样本每天一起做。正常胆红素反应的测定曲线为加入样品后反应曲线上升，孵育一段时间后，加入试剂2后曲线向下，根据下降的速率计算出胆红素的结果。观察所有出现负值的结果，发现加入试剂2后曲线不是下降而是上升。
, 百拇医药
2原因分析
2.1参数校正 重新核对仪器胆红素测定的参数没有差错，而且试剂1量加样本量大于183微升，试剂1量加样本量加试剂2量大于213微升，满足仪器检测的最小反应体积要求。
2.2更换试剂 我们用同厂家同批号的新开盒试剂更换下来后进行测定，结果中仍有负值出现，再用同厂家不同批号的试剂测定，结果也不能纠正。又换用不同厂家的试剂进行测定，结果也不能纠正。
2.3更换质控品 我们新打开一瓶在有效期的朗道质控品，严格按照室内质控的要求操作，结果未能纠正。换用其它厂家的质控品后，结果也不能纠正。
2.4检查光路 按照仪器的保养要求，重新进行仪器光路清洁，并且更换光源灯后进行测定，结果没有能够得到纠正。
2.5避免污染 在仪器设定中将胆红素测定项设为和所有测定项目均发生污染。为进一步避免污染，测试项目仅做胆红素一项测定，结果仍未纠正。
, 百拇医药
2.6更换试剂针和加样针 更换试剂针和加样针后结果得到纠正，说明结果出现负值是由试剂针和加样针老化引起的加样不准确引起的。
3讨论
最小反应体积是指仪器在测定吸光度时读数用于计算时，反应液液面高度不低于光度计光径的最小体积，它保证仪器的正确读数和计算，也是仪器测定精密度和经济性的指标之一。在单试剂终点法或速率法项目测定时，样品与试剂的总体积不得少于此参数，在双试剂终点法测定时，若加入试剂2之前读数，则样品与试剂1的总体积不得少于此参数。迈瑞Bs-300全自动生化仪要求：样本量加第一试剂量大于183微升，样本量加第一试剂量加第二试剂量大于213微升。在本例中，由于试剂针和样本针老化未能及时更换，从而使得加样量存在误差，导致试剂和样本的量达不到仪器要求的最小反应量，使光路不能完全通过反应液面，因此测定结果不稳定出现负值。
参考文献：
[1] 刘华香，林燕. 2型糖尿病患者血清尿酸胆红素测定的临床意义. 中华临床新医学 ，2010， 3(4)：359.
[2] 刘玉霞 ，朱晴晖 .结合胆红素和非结合胆红素直接测定在高胆红素血症中的应用. 检验医学 ，2008 ，23(2)：157.
[3] 彭梅， 舒宇， 廖秋兰等. 5种总胆红素测定试剂盒的比较分析. 检验医学与临床 ，2008 ，5(23)：1449., 百拇医药(李冬盎 官瑞霞)
【中图分类号】R446.1 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2012)11-0406-02
胆红素是老化的红细胞中的血红蛋白的代谢产物，血液中总胆红素和直接胆红素的含量测定有利于肝病和黄疸病的诊断[1]。直接胆红素增加常见于阻塞性黄疸和肝细胞性黄疸[2]，总胆红素增高见于：中毒性或病毒性肝炎、溶血性黄疸、恶性贫血、阵发性血红蛋白尿症、红细胞增多症、新生儿黄疸、内出血、输血后溶血性黄疸、急性黄色性肝萎缩、先天性胆红素代谢异常、果糖不耐受等，以及摄入水杨酸类、红霉素、利福平、孕激素、安乃近等药物[3]。最近本人在胆红素测定过程中发现在质控物和样本测定中总有负值出现，现将处理过程总结如下：
1临床资料
所用仪器为迈瑞Bs-300全自动生化仪，试剂为北京华亿亿康公司提供，质控品为朗道多值质控品。反应参数为：测定方法为终点法，反应方向为下降，主波长为450纳米，样本量为14微升，试剂1为280微升，试剂2为70微升，线性限20，孵育时间25，反应时间-1到25.质控品按要求配制和样本每天一起做。正常胆红素反应的测定曲线为加入样品后反应曲线上升，孵育一段时间后，加入试剂2后曲线向下，根据下降的速率计算出胆红素的结果。观察所有出现负值的结果，发现加入试剂2后曲线不是下降而是上升。
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2原因分析
2.1参数校正 重新核对仪器胆红素测定的参数没有差错，而且试剂1量加样本量大于183微升，试剂1量加样本量加试剂2量大于213微升，满足仪器检测的最小反应体积要求。
2.2更换试剂 我们用同厂家同批号的新开盒试剂更换下来后进行测定，结果中仍有负值出现，再用同厂家不同批号的试剂测定，结果也不能纠正。又换用不同厂家的试剂进行测定，结果也不能纠正。
2.3更换质控品 我们新打开一瓶在有效期的朗道质控品，严格按照室内质控的要求操作，结果未能纠正。换用其它厂家的质控品后，结果也不能纠正。
2.4检查光路 按照仪器的保养要求，重新进行仪器光路清洁，并且更换光源灯后进行测定，结果没有能够得到纠正。
2.5避免污染 在仪器设定中将胆红素测定项设为和所有测定项目均发生污染。为进一步避免污染，测试项目仅做胆红素一项测定，结果仍未纠正。
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2.6更换试剂针和加样针 更换试剂针和加样针后结果得到纠正，说明结果出现负值是由试剂针和加样针老化引起的加样不准确引起的。
3讨论
最小反应体积是指仪器在测定吸光度时读数用于计算时，反应液液面高度不低于光度计光径的最小体积，它保证仪器的正确读数和计算，也是仪器测定精密度和经济性的指标之一。在单试剂终点法或速率法项目测定时，样品与试剂的总体积不得少于此参数，在双试剂终点法测定时，若加入试剂2之前读数，则样品与试剂1的总体积不得少于此参数。迈瑞Bs-300全自动生化仪要求：样本量加第一试剂量大于183微升，样本量加第一试剂量加第二试剂量大于213微升。在本例中，由于试剂针和样本针老化未能及时更换，从而使得加样量存在误差，导致试剂和样本的量达不到仪器要求的最小反应量，使光路不能完全通过反应液面，因此测定结果不稳定出现负值。
参考文献：
[1] 刘华香，林燕. 2型糖尿病患者血清尿酸胆红素测定的临床意义. 中华临床新医学 ，2010， 3(4)：359.
[2] 刘玉霞 ，朱晴晖 .结合胆红素和非结合胆红素直接测定在高胆红素血症中的应用. 检验医学 ，2008 ，23(2)：157.
[3] 彭梅， 舒宇， 廖秋兰等. 5种总胆红素测定试剂盒的比较分析. 检验医学与临床 ，2008 ，5(23)：1449., 百拇医药(李冬盎 官瑞霞)