【摘 要】针对传统大肠杆菌表达凝乳酶发酵工艺的不足，在 10 m 3 新型高溶氧发酵罐上，对重组大肠杆菌( Recombinant E. Coli)连续流加补料发酵生产凝乳酶进行了工业化研究，优化了培养基配方和工艺条件。 结果表明：优化后的培养基以及工艺条件比优化前菌体浓度与酶活均具有较大的提升，对凝乳酶工业化发展提供了重要的技术支持。

    【关键词】凝乳酶;高密度发酵;培养基;流加培养;优化

    【中图分类号】R715 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2019)12-0112-01

    引言

    凝乳酶(Chymosin)是奶酪工艺中不可或缺的酶制剂，能使乳中蛋白质凝结成乳酪，在欧美等地制酪市场广泛应用[1]。凝乳酶早期来源于未断奶的小牛胃粘膜提取获得，原料来源受局限，产能较低，成本较高[2]。随着重组DNA技术和发酵工程的快速发展，凝乳酶基因成功在基因工程菌大肠杆菌中得到表达。但是局限于大肠杆菌一般为胞内酶，且菌体密度难以提高，总体产量不高等因素的制约，整体产能相对较低，在工业化上的应用带来的经济效益较差[3-4]。

    本研究在常规大肠杆菌发酵所用LB培养基的基础上进行配方改进 ......