鼻腔灌洗液在呼吸道疾病研究中的运用(2)
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二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)的发展使得对蛋白质混合物的分离达到可重复性和高分辨率，使得定性和定量分析细胞或组织标本中的蛋白质成为可能。20世纪70年代随着软电离技术ESI(电喷雾电离)和基质辅助的激光解析电离化飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrum，MALDI-TOF-MS)技术的出现，质谱成为现代蛋白质科学中最重要和不可缺少的部分[19]。
Lindahl等[20]就曾对过敏性鼻炎及哮喘患者NLF中的蛋白质进行分离，结果发现，与正常人相比，患者NLF中的CC-16蛋白减少而lipcortin-1升高，并且这两种蛋白质可能对过敏性鼻炎及哮喘的发病发挥一定的作用。Ghafouri等[21]对吸烟者和非吸烟者NLF的蛋白质进行了研究。结果发现，与非吸烟者相比，吸烟者的NLF中克拉拉细胞分泌蛋白减少，脂皮质素-1变异修饰体、3种酸性形式的α1抗胰蛋白酶和1种磷酸化半胱氨酸蛋白酶增多。而且吸烟者的NLF富含较多的腭肺鼻上皮克隆(palate, lung and nasal epithelial clone，PLUNC)，一种近来被识别的气道刺激标志物 [22]。这些结果显示，NLF的双向电泳结果可用于吸烟者NLF中表达蛋白变化的评估。克拉拉细胞分泌蛋白CC16，CC10和脂皮质素-1是两种抗炎及磷脂酶A2抑制蛋白，这些蛋白表达水平的改变对由吸烟引起的气道炎症而言非常重要。
4 展望
鼻灌洗方法易操作、无侵害性，指标客观可靠，具有广阔的应用前景。在NLF的蛋白组学研究中样品前处理过程主要包括三方面内容：① 去除高丰度蛋白质，提高对低丰度蛋白质的检测；② 降低体液样品中的盐浓度，提高等电聚焦效果；③ 尽可能分成多个组分，富集低丰度蛋白质，提高分辨率。在不久的将来, 有望建立一个包括人各种肺病的NLF和BALF的完整二维电泳图谱。而基于上述有效蛋白质组的研究，对于明确各种肺病的发病机制、疾病的诊断及判断疾病的预后等将产生广泛而深远的影响。
5 参考文献
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[9]Krakowiak A, Ruta U, Gorski P, et al ......
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