医院环节中金黄色葡萄球菌两种检测方法的对比研究
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参见附件。
[摘要] 目的：考察不同采样及检测方法对医院环节中金黄色葡萄球菌检出率的影响。方法：采集1097份医院各环节样品作为金黄色葡萄球菌的检测试验样品。结果：传统采样及检验方法即本文中A法对金黄色葡萄球菌的检出率为2%，改用本文B法后对金黄色葡萄球菌的检出率为12% 。结论： 本文中所提到的B法比传统方法即本文中A法更有利于提高医院环节中金黄色葡萄球菌的检出率。
[关键词] 医院环节；金黄色葡萄球菌；检测
前言
目前，对医院环节中金黄色葡萄球菌的采样和检测，多采用国家标准规定的常规检验方法，但检出率偏低。若采取PCR、快速纸片法等检测技术，虽能提高检测效率，但成本过高且得不到目标菌株，不利于金黄色葡萄球菌的耐药性等进一步研究分析。因此我们针对以上问题，将国家标准中采样方法改变，并将国家标准中SCDLP的增菌时间从24小时延长到48小时，将第一次分离的血平板改为显色平板，与国家标准方法检测效果进行比较。
1 材料与方法
1.1 样品来源
上海市宝山区各大医院中各个环节如物体表面、工作人员手等，共采集1097份样品。
1.2培养基和试剂
A法[1]：含0.3%硫代硫酸钠的无菌洗脱液，SCDLP液体培养基、血平板、血浆凝固酶。
B法：含0.3%硫代硫酸钠的SCDLP液体培养基、金黄色葡萄球菌显色平板、血平板、血浆凝固酶。
1.3方法
1.3.1 A法[1]
用浸有含0.3%硫代硫酸钠的无菌洗脱液的棉拭子涂抹物体表面，剪去手接触部位后，将棉拭子投入 10ml含0.3%硫代硫酸钠无菌洗脱液试管内， 按1：10的比例将上述样品接种50mlSCDLP液体培养基中，置36℃±1℃培养箱，培养24h。分别用接种环取增菌液1 环，划线接种于血平板，于37 ℃培养24 h。金黄色葡萄球菌在血平板上的菌落形态为：菌落较大，圆形，光滑凸起，白色或金黄色，周围有透明溶血圈。挑取可疑菌落划线于血平板上纯分。金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，血浆凝固酶试验为阳性，并能发酵甘露醇产酸。
1.3.2 B法
用浸有含0.3%硫代硫酸钠的SCDLP液体培养基的棉拭子涂抹物体表面，剪去手接触部位后，将棉拭子投入 10ml含0.3%硫代硫酸钠SCDLP液体培养基试管内，置36℃±1℃培养箱，培养48h。分别用接种环取增菌液1 环，划线接种于金黄色葡萄球菌显色平板，于37 ℃培养24 h。金黄色葡萄球菌在金黄色葡萄球菌显色平板上的菌落形态为：圆形，光滑凸起，粉红色。挑取可疑菌落划线于血平板上纯分。生化鉴定等同A法。
2 结果
共检1097件样品中， A法共检出22株金黄色葡萄球菌。在B法中，A法检出金黄色葡萄球菌的这22件样品中同样检出金黄色葡萄球菌，并且在另外110件样品中B法也检出金黄色葡萄球菌，但A法未能检出。B法共检出132株金黄色葡萄球菌。A法检出率为2%，B法的检出率为12%。B法比A法的检出率高出10%。详见表1。
3 讨论
由于金黄色葡萄球菌对多种抗菌药物耐药，造成临床治疗困难，已引起临床普遍关注与重视。所以对医院中特别是神经内科、ICU、烧伤科、神经外科、皮肤科和呼吸科、新生儿室等各个环节的金黄色葡萄球菌的监测尤为重要[2] 。
由表1可见，A法与B法对于金黄色葡萄球菌的检测效果有显著性差异(P=0.00)。另外从检测成本方面考虑，B法虽比A法稍高但低于PCR法；并且B法能捕捉到活菌，PCR法却不能。
A法将采样棉拭子放入含0.3%硫代硫酸钠的无菌洗脱液中，再将此洗脱液按一定比例放入SCDLP中等于间接稀释了菌量，不利于金黄色葡萄球菌的检出。而B法将采样棉拭子直接放入含0.3%硫代硫酸钠的SCDLP中增菌培养，少去了稀释环节，更有利于金黄色葡萄球菌的检出。0.3%硫代硫酸钠为中和剂以去除采样棉拭子中可能残留的消毒剂。把增菌时间从24小时延长到48小时，大大促进了金黄色葡萄球菌的生长，但同时也促进了杂菌的生长。所以将第一次分离的血平板改为金黄色葡萄球菌的显色平板。
显色培养基是新型的检测手段， 它在选择培养基中加入检测目标菌的特征性酶的显色底物， 当目标菌在培养基上生长时， 其特征性酶就能降解显色底物并产生带有特殊颜色的代谢物， 使菌落形成特定的颜色或形态。而干扰菌被抑制或不产生特征性，酶而不显色， 因而能被区别，大大减少假阴性的机会 [3]。
医院环境污染及针对性的环境消毒是控制医院感染的一项重要措施。由于金黄色葡萄球菌可在病房等自然环境中存活很长时间，甚至可达1年之久，且有多项研究结果已证实了环境污染的严重程度与医院内交叉传播之间的相关性[4]。所以动态、实时、有效的对医院各环节中金黄色葡萄球菌的监测十分重要。最后感谢上海市疾病预防控制中心葛忆琳老师的指导和帮助。
[参考文献] ......
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