浅谈ELISA方法检测HBsAg出现假阳性一例原因及预防措施
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[中图分类号]R446.6
[文献标识码]A
[文章编号]1005-0019(2009)7-0016-01
乙型肝炎在我国发病率很高,是当前严重危害人们身体健康的传染病之一,HBsAg是乙肝感染指标之一。因此,HBsAg的检测往往是健康体检的项目之一。近期,我县实验中学组织全校教职工来我院进行健康查体,所查项目包括B超、心电图、胸透、肝功、血脂、HBsAg等。在HBsAg的检测过程中,出现了HBsAg假阳性一例。根据笔者多年的临床经验,对出现HBsAg假阳性的原因及预防措施谈谈自己的看法。
1材料与方法
1.1一般资料:健康体检者,男,31岁,血压、心率、心电图、B超、肝功、血、尿常规及其他体格检查均未见异常,无既往病史。
1.2标本:体检者清晨空腹按要求采血,按常规操作分离血清,无溶血、乳糜及黄疸等。
1.3方法:用ELISA方法检测,试剂为潍坊3V公司生产(批号20090301),洗板机(ZMX988B全自动洗板机)、酶标仪(WELLSCANMK3)均处于正常工作状态。
2结果
2.1按说明书要求操作,阴性、阳性对照、空白、质控均在标准范围内,此体检者HBsAg结果显示阳性。我们长期工作以养成习惯,所有ELISA检测HBsAg阳性结果均用胶乳法(广州万孚生物技术有限公司生产,批号W0390321S)复查,此体检者复查结果显示为阴性,前后结果不一致。其余各样本前后结果一致。
2.2由于受条件限制,建议体检者到上级医院复查确诊,确诊结果为阴性(检测方法不详)。
3讨论
ELISA方法检测HBsAg出现假阳性的样本时有报道,原因也各不相同,从文献上看,引起假阳性的原因大体上分为标本、试剂、操作等原因[1]。
3.1标本原因,可分为外源性和内源性。
3.1.1内源性:血清中的补体可与IgG的Fc段结合;血浆中的纤维蛋白原和酶结合物一起易粘附到ELISA检测杯上不易洗掉;血清中有类风湿因子(RF),RF可与抗体结合等都易造成假阳性。
3.1.2外源性:血清分离不彻底,有血细胞加入反应杯;标本污染、溶血等。
3.2试剂:试剂从冰箱取出时间短;不同批号、不同包装试剂混用等。
3.3操作:工作人员责任心不强,粗心大意,加错样本;加样不准;洗版不彻底等。
3.4为了对患者、对科室、对自己负责,我们应采取下列措施尽量避免假阳性结果的产生。
3.4.1标本内在因素不易避免,出现阳性结果时应采用不同厂家、不同批号的试剂进行复查 ......
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