脐血血浆对T淋巴细胞增殖\分化的影响续一连(1)
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2011年11月1日
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【摘要】目的 探讨混合脐血血浆(cord blood plasmaCBP)在植物血凝集素(phytohemagglutin,PHA)诱导脐血源性T淋巴细胞增殖中的作用。方法 收集脐血血浆和脐血单个核细胞；将脐血单个核细胞分为CBP+PHA和PHA两组，检测两组细胞增殖率及免疫表型。结果 CBP+PHA组细胞增殖指数低于PHA组，但无统计学意义(P>0.05)；两组细胞表型都以CD3+、CD4+为主，两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 混合脐血血浆对脐血源性T淋巴细胞增殖、分化影响不明显，可能与RPMI1640培养体系具有相似的效果。
【关键词】脐血 T淋巴细胞 增殖 分化
中图分类号：R392文献标识码：A文章编号：1005-0515(2011)11-021-02
Effects of mixed cord blood plasma on cord blood-derived T lymphocyte proliferation and differentiation
XU Yi-lian
(Jining Blood Center, Jining 272041,China)
【Abstract】Objective To study on the effects of mixed cord blood plasma(CBP) on PHA induction of cord blood-derived T cells. Methods collected cord blood plasma and umbilical cord blood mononuclear cells(CBMCs); CBMCs were divided two groups:CBP+PHA group and PHA group, measured the proliferation index and immune phenotypes of esch group.Results The results showed that the proliferation index of CBP+PHA group was lower than that PHA group,but there had no statistical significance (p>0.05);the immune phenotypes of two groups were both mainly CD3+and CD4+,differences had no statistical significance (p>0.05).Conclusion Suggested that the effects of CBP on proliferation and differentiation of cord blood-derived T cells were similar to that of 20% NBCS1640.
【Key words】cord blood plasma T lymphocyte proliferation differentiation
近年来对于脐血的研究和应用又重新引起人们的重视，国内学者对脐血造血干/祖细胞和脐血血浆(cord blood plasma CBP)进行了大量的基础和临床研究，如脐血细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer,CIK)、细胞毒T淋巴细胞(cytotoxicity T lymphocyte,CTL)细胞等的体外扩增及其杀伤活性的研究[1-2],CBP输注治疗再生障碍性贫血[3]，CBP用于恶性血液病患者化疗后骨髓造血重建的研究等[4]。但CBP用于脐血源性T淋巴细胞培养的研究鲜有报道。本研究采用细胞培养、二甲基四氮唑盐(3,(4,5-dimethylthiazol-2-y1)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)、透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)等方法，观察CBP对PHA诱导的脐血源性T淋巴细胞分化和增殖的影响，为CBP的应用和T淋巴细胞的体外扩增、培养提供实验依据。
1 材料和方法
1.1 材料
脐血取自济宁市人民医院产科；RPMI1640(美国GIBCO)；MTT、甲基纤维素450、PHA(美国Sigma)；新生小牛血清(杭州江滨生物技术有限公司)； CD3、CD4、CD8单克隆抗体以及免疫组化PV试剂盒、DAB显色试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)； Ficoll淋巴细胞分离液(上海荣盛生物试剂厂)； Mk3型酶标仪(上海热电仪器有限公司)；H-7500型透射电子显微镜(日本)； CMIAS多功能真彩病理图像分析系统(北京)。
1.2 脐血采集
足月顺产新生儿，在距新生儿脐部5～7 cm处，用血管钳钳紧脐带，在两钳中间断脐，包扎处理新生儿脐带后，放开胎盘侧脐带游离端的止血钳以便收集脐血，用16号针头的50 ml注射器刺入脐静脉，吸取脐血约50 ml ......
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