大鼠颈交感神经激惹模型制作
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[摘要] 目的 探讨建立一种便捷实用的大鼠颈交感神经激惹模型的制作及评价方法，以适应进一步对交感神经激惹的研究。方法 选用250g的SD大鼠24只，结扎右侧颈交感神经的方法制作大鼠颈交感神经激惹模型，于术后6周对实验动物进行Bederson神经功能评分、前肢放置试验。结果 术后6周时Bederson神经功能评分实验组评分高于对照组(P<0.01)；前肢放置试验组实验侧得分均低于对照组(P<0.01)。结论 结扎右侧颈交感神经的方法制作大鼠颈交感神经激惹模型稳定、可靠，具有进一步的推广意义，并可用于颈交感神经的相关实验研究。
[关键词] 交感神经； 动物模型
[中图分类号] R322.8 [文献标识码] B [文章编号] 1005-0515(2012)-01-052-01
目前临床上由颈交感神经激惹引起的疾病患者，其症状较为复杂、主观性强，又不具有特异性，因此诊断比较困难，易漏诊、误诊。而就交感神经长期激惹对周围神经功能改变情况的研究很少，为此，我们设计了应用结扎大鼠颈交感神经的方法制作交感神经激惹模型，观察其神经行为学改变，希望能做出稳定可靠的动物模型，也为下一步的干预实验奠定基础。
1 材料与方法
1.1 实验动物 健康成年SD大鼠24只,体重250g，随机分为两组：激惹组(n=12)成年SD大鼠麻醉条件下行右侧颈交感神经颈中节部分结扎；对照组(n=12)成年SD大鼠麻醉条件下暴露右侧颈交感神经颈中节后缝合。最终全部大鼠成活。
1.2 手术方法 实验组：10%水合氯醛腹腔注射麻醉，用量0.3ml/100g大鼠体重，备皮，络合碘消毒颈胸部皮肤，仰卧位固定。按沙轲等的方法，手术显微镜下取颈部前正中切口，显露大鼠右侧颈中交感神经节。结扎右侧的颈中节，缝合颈部伤口。对照组仅显露大鼠右侧颈中交感神经节，缝合颈部伤口。
全部手术操作过程不超过10分钟，出血量多者弃之不用，手术及麻醉复苏过程中保持局部环境温度35-37℃。
1.3 模型评价
1.3.1 Bederson神经功能评分 0分：无神经功能缺损；1分：前肢出现任何屈曲成分(即提尾悬空实验阳性)，不伴其他不正常；2分：侧推抵抗力下降(即侧向推力试验阳性)，伴前肢屈曲，无转圈行为；3分：同2级行为，伴自发性旋转(自由活动时向瘫痪侧划圈)。
1.3.2 前肢放置试验 大鼠每侧受测10次，前肢触及桌面角边缘次数为该侧得分。注意：抓握大鼠要轻柔，前肢自由悬垂，试验前轻轻上下活动大鼠，尽量让其放松，如大鼠挣扎，肌肉紧张或肢体放在试验者手上不计在内。
1.4 统计学分析 对实验结果采用SPSS13.0软件进行统计分析，采用Mann-Whitney U秩和检验，以P<0.05为有差异。
2 结果
2.1 Bederson神经功能评分 经过检测，术后6周实验组有9只大鼠Bederson神经功能评分为1分，另外3只为0分，而对照组12只大鼠均为0分，经过统计学分析两组数据比较有显著差异，P<0.01，见表1。
表1 术后6周两组大鼠Bederson神经功能评分比较(n=24)
2.2 前肢放置试验 经过检测，术后6周前肢放置试验实验组左侧评分均为10分，实验组右侧评分情况为5只7分、4只8分，3只9分，对照组左右侧评分均为10分，两组左侧前肢放置试验评分比较无明显差异，P>0.05，两组内双侧对比也没有差异，P>0.05，而两组右侧对比有明显差异，z＝-4.48，P<0.01。
3 讨论 现有的研究交感神经的动物模型大多使用大动物，如猫、兔、狗等，但这些动物价格贵，饲养要求高。而大鼠因为其颈交感神经干在解剖结构和功能上与人类极为相似，是理想的实验动物。并且来源广泛，适于大量制作模型。
颈肩痛病人大多是慢性疾病，病程相对较长。本实验选择在大鼠术后6周做模型的评价，相当于在人类身上有大约2年的病程。此时即保证了伤口的愈合，同时由于交感神经激惹产生的一系列症状和体征也能够充分的体现出来。
我们用缝扎的方法对交感神经进行部分结扎，结扎使其表面的微血管阻断，避免完全阻断交感神经，并保证线结不脱落。而随着时间的推移，由于神经表面压迫持续不缓解，局部将出现充血、水肿，进而对交感神经本身造成机械压迫的刺激。颈交感链位于颈椎横突前方，周围并无坚韧的组织，而是呈曲折走行，较为松弛，有一定的活动度。由于其紧贴颈椎。
行为是机体功能的重要表现，对机体行为进行评估是神经科学研究领域的重要组成部分之一。行为学指标用于对实验动物的运动功能、神经功能和精神状态的评估，具有全面反映实验动物整体状态的作用。因此，本实验选取国内外较为公认的，相对客观的神经行为学检测方法，包括Bederson神经功能评分、前肢放置试验、作为模型的评价标准，以了解实验鼠损伤后在姿势改变、感觉的灵敏度及动作协调性等方面的改变。以期给出一个相对客观、可以量化的评价方法。在正式测试前的训练非常重要 ......
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