卡氏微柱凝胶法在我院血型鉴定中的应用总结
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【中图分类号】R446.62【文献标识码】A【文章编号】1005-2720(2009)05-0267-02
【摘要】目的：总结卡式微柱凝胶法在我院临床血型鉴定中的应用。方法：对1254例病人同时采用卡式微柱凝胶法与传统手工操作法进行血型鉴定。结果：卡式微柱凝胶法正确率为100%，手工正定型法为98%，正定型+反定型为100%，但在操作标准化、灵敏度、特异性、客观性等方面，卡式微柱凝胶法具有明显优势。结论：卡式微柱凝胶法对提高血型鉴定的检验质量与水平有明显的促进作用。
【关键词】血型；血型鉴定；微柱凝胶法
以前国内各级医院血型鉴定绝大多数都是手工操作，而且在一般情况下仅做正向定型法。由于手工操作不易标准化，且干扰因素较多，血型错检时有发生。近年来卡式检测法(微柱凝胶试验)进行血型鉴定由于准确、操作简单、省时、试剂消耗少、环境污染少在各级医院应用普便。我院血库于2002年12月开始采用微柱凝胶法来进行血型鉴定，并对1254例住院病人进行卡式微柱凝胶法与手工操作平行实验，实验结果进行比较，现报道如下：
1 材料与方法
1.1 仪器：孵育器：Diamed-ID(达亚美)ID-Incubator 37 SⅠ专用孵育器；离心机：Diamed-ID(达亚美)ID-Centrifuge 12 SⅡ专用离心机。
1.2 试剂
1.2.1 仪器试剂：达亚美公司ABO/Rh卡，批号50053.22.04。Diluent 2低离子缓冲液。
1.2.2 手工试剂：抗A、抗B血清为长春生物制品研究所生产，生产批号20030918。单克隆抗D为台湾贝索公司生产，生产批号1809180。
1.3 标本来源：我院2003年1~6月新入院患者1254例，其中男性756例，女性498例，年龄1~92岁，抽取病人静脉血2ml，肝素抗凝，同时分别进行手工操作与卡式检测法血型鉴定。
1.4 方法
1.4.1 卡式检测法：按达亚美公司卡式血型鉴定操作手册进行。取Diamed-ID ABO/Rh血型鉴定卡一个，标记病人姓名、病历号等，撕去卡上部的锡纸膜。配置5%的红细胞悬液(25μl患者RBC+0.5ml Diluent 2低离子缓冲液)。在A、B、D孔分别加入已配制的2%病人红细胞悬液10μl。37℃孵育15min。离心。按说明书提示标准判读结果。
1.4.2 手工操作：按《全国临床检验操作规程》[1]规定正向定型及正向定型+反向定型试管法进行。
2 结果
将上述两种方法的鉴定结果进行比较，凡正反定型以及卡式检测法所测血型不符合者，将血液红细胞用生理盐水洗涤3次，再用两种方法重复测定，统计出正确百分率。见表1。
3 讨论
卡式微柱凝胶法是抗原抗体反应与凝胶分子筛技术相结合的产物。通过调节葡聚糖凝胶的浓度来控制分子筛孔径大小，使分子筛只允许游离分子通过，从而达到分离凝集红细胞和游离红细胞的目的。达亚美公司ABO/Rh卡既可以应用于ABO血型系统的检测，还可以进行Rh血型系统中抗D的鉴定，同时可通过反定型方法对个体的血型同时鉴定。这与《全国临床检验操作规程》[1]对血型鉴定要求同时通过正、反向定型来准确鉴定ABO血型相一致，且操作简单，敏感性、特异性均高于手工正定型法；而正反定型相结合虽然弥补了正定型的不足，正确率达到了100%，但在标准化操作等方面同卡式检测法相比仍有很大差距。
Lapiere等[2]报道了他们所发明的凝胶离心技术的敏感性和良好的重复性。卡式微柱凝胶法的优点是采用标准化定量操作，最大限度减少操作人员的随意性，重复性好，由于采用了凝胶分子筛技术，将凝集红细胞与游离红细胞分离开，使结果一目了然，避免了操作者的主观影响[3]；所需标本量少，操作简便，省去繁琐的洗涤过程，不再担心抗人球蛋白抗体被中和而产生假阴性；便于保存，一般在冰箱可保存数月至1年，还可进行拍照提供永久记录，以备发生血型鉴定差错时查找原始资料；塑料卡易于销毁，不污染环境[4]。
总之，卡式微柱凝胶法即使对无经验的操作者来说，结果判读上也比试管法更为可靠得多，且操作简单、省时，试剂消耗少，成本低，环境污染少。卡式微柱凝胶法对提高血型鉴定检验质量与水平有明显的促进作用，故它在临床上的应用必将得到进一步的推广。
【参考文献】
[1] 叶应妩，王毓三.全国临床检验操作规程[M] ......
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