RASSF1A基因在膀胱移行细胞癌中转录表达和启动子甲基化的研究(2)
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1.4 PCR产物分析(1)RT-PCRPCR产物在2%琼脂糖凝胶中电泳35分钟,电压90伏。阳性结果为RASSF1A基因RT-PCR引物扩增出的300bp的条带。(2)MPS:PCR产物在2%琼脂糖凝胶中电泳1小时,电压40伏,阳性结果为RASSF1A基因甲基化引物扩增出的94bp的条带和非甲基化引物扩增出的108bp的条带。
1.5 统计学方法采用X2检验以及fisher精确概率算法,以P<0.05为有差异显著性标准。
2 结 果
2.1 8例正常膀胱组织中的RASSF1AmRNA全部表达,表达率100%(8/8),在TCC组织中表达率为35.1(13/13),两者间的表达差异有显著性(P<0.05)。见图1表2,在8例正常膀胱组织中无一例出现RASSF1A基因启动子甲基化,在TCC组织中RASSF1A基因启动子甲基化频率为51.3%(19/37),两者间的表达差异有显著性(P<0.05);不同临床分期、病理分级间的表达差异无显著性(P>0.05),见图2表2。在19例启动子异常甲基化的TCC组织中,有16例同时伴有RASSF1A mRNA表达缺失,两者之间存在明显相关性(P<0.01),见表3。
3 讨 论
RASSF1A基因作为一种肿瘤抑制基因,参与Ras/RASSF1A/ERK通路的信号传导,通过抑制Ras激活生长效应信号的传导途径,使其丧失抑制生长,促进凋亡和衰老的功能而发挥抑制肿瘤发生的作用,其功能失活将导致对肿瘤的抑制作用丧失 ......
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