小柴胡汤对大鼠肝细胞脂肪变性及葡萄糖调节蛋白表达的影响(3)
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参见附件。
2.3.6 肝组织中葡萄糖调节蛋白78 mRNA表达半定量RT-PCR检测 用RNeasy Mini Kits一步法提取肝组织总RNA(方法按说明进行)，取RNA样品2 ?g以随机引物进行反转录反应合成cDNA，以cDNA为模板进行PCR扩增。GRP78正义链：5’-TAATCAGCCCACCGTAACAATC-3’，GRP78反义链：5’-ACCTCCCAG CTTCTCTTTATCT-3’；扩增片段为315 bp；反应条件为：94 ℃ 3 min后，94 ℃ 30 s， 59 ℃ 30 s，72 ℃ 45 s，循环24次，最后72 ℃、10 min。GAPDH作为内对照，正义链：5’-CAGTGCCAGCCTCGTCTC AT-3’，反义链5’-AGGGGCCATCCACAGTCTTC-3’；扩增片段为595 bp；反应条件为94 ℃、3 min后，94 ℃、30 s，58 ℃ 30 s，72 ℃、45 s，循环28次，最后72 ℃ 10 min。PCR反应产物经过1%琼脂糖凝胶电泳检测，凝胶成像仪观察拍照。
3 统计学方法
运用SPSS11.0软件包进行统计学分析，计量资料以—x±s表示，组间比较使用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。
4 结果
4.1 小柴胡汤对大鼠体质量、肝湿重、肝指数影响(见表1)
表1 各组大鼠体质量、肝湿重、肝指数变化比较(—x±s)
组别只数体质量(g)肝湿重(g)肝指数
正常组5273.20±18 ......
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