舒郁宁心汤对抑郁模型大鼠海马区脑源性神经营养因子和酪氨酸激酶B表达的影响(2)
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BDNF(批号909083W)和TrkB(批号019904)多克隆抗体为北京博奥森生物技术有限公司产品。二抗显色试剂盒为EnVision Detection Kit基因科技(上海)有限公司产品(编号GK500705)。全自动真空脱水机(LEICA ASP300)、组织包埋机(LEICA EG1140H)、石蜡切片机(LEICA RM2135)、展片机(LEICA HI1210)均为德国LEICA公司产品。光学显微镜为日本OLYMPUS BX60系统显微镜。APES防脱玻片、PBS缓冲液、柠檬酸盐缓冲盐、3%H2O2为北京中杉金桥生物技术有限公司产品。
2 实验方法
2.1 分组及模型建立
动物饲喂于本院实验动物中心SPF级啮齿类动物实验室，温度20～24 ℃，噪声≤60 dB，相对湿度40%～70%， 12 h/12 h昼夜节律。70只SD大鼠自由摄食和饮水，适应性饲养7 d后行敞箱(open-field)实验进行行为学评分，选择得分相近的60只大鼠随机分为6组：空白组、模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、氟西汀组，每组10只。采用孤养加慢性轻度不可预见性的应激(chronic unpredictable mild stress，CUMS)抑郁模型[2]并稍加改进。空白组每笼饲养5只，正常饮食、饮水，不予任何刺激；模型组及药物干预组每笼饲养1只，并接受21 d慢性应激刺激，包括：禁水(24 h)、禁食(24 h)、夹尾(1 min)、电击足底(20 V ......
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