补阳还五汤对肺纤维化大鼠血清Ⅲ型前胶原氨端肽和Ⅳ型胶原氨端肽含量的影响(2)
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1.2 药物
硫酸博莱霉素(200 mg，大连美仑生物技术有限公司，批号20111111)，强的松片(5 mg，浙江仙居制药股份有限公司，批号120447)，补阳还五汤由黄芪、赤芍、桃仁、红花、当归、川芎、地龙组成(均为浓缩颗粒，四川新荷花中药饮片有限公司)，药物比例为5∶1∶1∶1∶1∶1∶1。浓缩药液至含原药材l g/mL，灭菌，置于4 ℃冰箱中保存备用。
1.3 主要试剂与仪器
PCⅢ放免分析试剂盒(批号121120)、Ⅳ-C放免分析试剂盒(批号121130)，北京北方生物技术研究所。GC-1200放射免疫分析仪(科大创新股份有限公司中佳分公司)，BS-600L电子天平(上海友声衡器有限公司)。
2 实验方法
2.1 分组与造模
参考文献[1-2]方法。大鼠饲养1周后，随机分为假手术组、模型组、强的松组和补阳还五汤高、中、低剂量组，每组24只。大鼠适应环境3 d后，除假手术组外，余各组以1.5%戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔注射麻醉后，将大鼠仰卧固定于实验台，固定头和四肢，常规消毒，沿颈部正中线作一切口，钝性分离各层组织，暴露气管，经气管软骨环间隙向气管内缓慢注入博莱霉素生理盐水溶液(5 mg/kg)0.2～0.3 mL，注射后迅速将大鼠直立并旋转，使药液在肺内均匀分布，假手术组在相同条件下向气管内注入等容积生理盐水。术后3 d，所有大鼠颈部缝合处喷涂阿米卡星洗剂。
2.2 给药
造模成功后第2日开始灌胃给药，假手术组、模型组给予生理盐水10 mL/(kg·d)，强的松组给予强的松混悬液4.2 mg/(kg·d)，补阳还五汤高、中、低剂量组给予补阳还五汤18.48、9.24、4.62g/(kg·d)。给药容积1 mL/kg，连续28 d。
2.3 标本采集
于造模后第7、14、28日分3批处死动物，每组8只，10%乌拉坦腹腔注射麻醉大鼠，将麻醉后的大鼠仰卧定位于手术台上。打开腹腔，将肠管推向左侧，然后用眼科弯镊轻轻分开脂肪，暴露腹主动脉，将采血器与血管平行刺入腹主动脉，接通负压真空管，取血约4～5 mL，静置30 min后，3000 r/min离心15 min ......
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