白芍药材薄层色谱鉴别和高效液相色谱特征图谱研究(2)
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3.6 稳定性试验
取同一供试品溶液，照上述色谱条件，分别在0、2、4、6、8、24 h进样，记录色谱图并积分，图谱导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版》处理，得到各次进样的相似度，经分析RSD=0.51%，符合特征图谱的相关技术要求。以8号峰为参照，对各图谱共有模式中已标定的15个共有峰进行计算，各图谱共有峰相对保留时间及相对峰面积值的RSD值分别在0.00%～1.79%和0.67%～4.63%之间，各主要色谱峰的相对保留时间和相对峰面积均无明显变化，表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。
3.7 不同产地白芍药材指纹图谱共有峰的相对保留时间
以3号峰为参照，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版》对白芍样品共有模式中已标定的15个共有峰进行计算，各样品的指纹图谱共有峰相对保留时间见表4。
4 讨论
本研究比较了甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚超声提取液的薄层色谱。结果甲醇提取液斑点最多，且颜色较深。试验先后比较了三氯甲烷-乙酸乙酯、三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇、三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸，结果以正三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)为展开剂可获得重复性好的薄层色谱效果，芍药苷Rf值为0.60。考察了不同温度对色谱的影响，结果温度在28 ℃以下时展开后的色谱斑点集中，边缘效应小，芍药苷Rf值在0.42～0.60之间。
本研究建立了白芍药材HPLC指纹图谱，相似度评价结果表明，安徽、浙江产白芍样品指纹图谱相互之间较为吻合，虽然各特征峰相对含量存在一定差异，但整体轮廓均符合共有特征。本试验从白芍药材整体色谱图入手，选取15个特征峰构成了白芍的指纹图谱，以共有模式作为白芍道地药材的鉴别标准，能提供更全面的质量控制信息。采用TLC鉴别和HPLC指纹图谱评价白芍质量，可作为白芍道地药材内在质量控制的评价方法。
参考文献：
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：96.
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[3] 周强，栗占国.白芍总苷的药理作用及其在自身免疫性疾病中的作用[J].中国新药与临床杂志，2003，22(11)：687-691.
(收稿日期：2014-05-28；编辑：陈静)
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