1 实验材料

    1.1 动物

    清洁级健康雄性SD大鼠70只，鼠龄4～5周，体质量(180±20)g，湖南中医药大学实验动物中心提供，动物合格证号SCXK(湘)2009-0001，饲养于湖南中医药大学SPF级动物房。

    1.2 药物

    六味地黄汤(熟地黄24 g、山药12 g、茯苓9 g、山萸肉12 g、泽泻9 g、牡丹皮9 g，购自湖南中医药大学第一附属医院药剂科)，将饮片药材加5倍的自来水浸泡2 h，煮沸后文火煎煮30 min，过滤后收集煎液，剩余的药渣再加少量水煎煮，得二煎液。将两煎液混合，在水浴恒温器上浓缩至含原药材1 g/mL。马来酸依那普利片购自湖南千金湘江药业股份有限公司，批号20130522，每片10 mg加蒸馏水10 mL制成悬浊液，浓度为1 mg/mL。

    1.3 主要试剂与仪器

    一抗为兔抗大鼠HIF-1α、CollⅠ、CollⅢ多克隆抗体(美国Santa Cruz)，兔二步法免疫组化检测试剂盒(PV-6001)、二抗为山羊抗兔(北京中杉金桥公司)，DAB显色试剂盒(武汉博士德生物技术有限公司) ......