1.5.3 脑组织缺氧诱导因子-1α和水通道蛋白-4基因表达检测 冰浴条件下用Trizol Reagent试剂抽提脑组织总RNA，用超微量核酸测定仪检测RNA浓度和纯度。用GoScriptTM Reverse Transcription System试剂盒合成cDNA第一链，按荧光定量 PCR操作说明书进行PCR反应，反应条件：预变性95 ℃、2 min，变性95 ℃、15 s，退火58 ℃、45 s，延伸60 ℃、1 min。共45个循环。每个样品各平行3次，数据经2-ΔΔCt处理后进行相对表达量分析。其中，β-actin、HIF-1α和AQP-4引物由TaKaRa宝生物工程(大连)有限公司设计并合成。基因序列为：HIF-1α上游引物5'-GGACGATGAACATCAAGCA-3'，下游引物5'- AGGAAT GGGTTCACAAATCAGCA-3'，扩增产物长度146 bp；AQP-4上游引物5'-TGGAGCCAG CATGAATCCAG-3'，下游引物5'-ACGTTTGAGCTC CACATCAGGAC-3'，扩增产物长度157 bp；β-actin上游引物5'-CATCCGTAAAGACCTCTATGCCAC-3' ......