2.4 细胞黏附实验检测MCF-7细胞黏附能力

    收集对数生长期MCF-7细胞，以2.5×105个/mL的密度接种于6孔板中，2 mL/孔，置于37 ℃、5%CO2饱和湿度的培养箱中培养。待24 h后，对照组加入基础培养基，药物干预组分别加入终浓度为4 mg/mL板蓝根、槐耳和槐耳板蓝根双向发酵提取物的MEM基础培养基(无FBS)，设2个复孔，置于37 ℃、5%CO2饱和湿度的培养箱中培养。药物作用48 h后收集细胞，0.25%胰酶消化，1000 r/min离心5 min，弃上清液，10%FBS的MEM完全培养基重悬细胞并调整细胞密度为2×105个/mL。将细胞接种于24孔板，每孔加1 mL，设3个复孔，37 ℃、5%C02饱和湿度培养箱培养4 h，吸出培养液，PBS洗3次，洗去未黏附细胞。甲醇固定20 min(或95%乙醇固定10 min)，用0.1%结晶紫染色15～20 min，清水洗3次，风干，拍照，计算细胞抑制率。细胞抑制率(%)=(对照组细胞黏附数-药物干预组细胞黏附数)÷对照组细胞黏附数×100%]。实验重复3次。

    2.5 RT-PCR检测MCF-7细胞细胞基质金属蛋白酶-9和波形蛋白基因表达

    将5×105个细胞接种于25 cm2培养瓶中，普通培养液培养过夜后，根据分组换用不同培养液继续培养48 h后弃培养液。收集培养细胞，采用Trizol两步法提取MCF-7细胞内的总RNA ......