复方黄连膏中雄黄的质量控制(1)
摘要：目的 控制复方黄连膏中雄黄的质量。方法 对雄黄中毒性成分三氧化二砷采用古蔡氏法进行限度检查；对雄黄主要成分二硫化二砷利用硫酸钾、硫酸铵和硫酸消解后采用滴定法进行定量分析。结果 复方黄连膏中可溶性砷含量不高于15.6 μg/g，二硫化二砷含量不低于2.21 mg/g。结论 本方法简便易行，可以有效控制制剂中雄黄的质量。
关键词：复方黄连膏；雄黄；三氧化二砷；二硫化二砷
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2018.03.015
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2018)03-0068-04
Abstract： Objective To control the quality of realgar in compound Huanglian Ointment. Methods As2O3 which is the toxic component of realgar was carried limit test by Gutzeit's test； Potassium sulfate， ammonium sulfate and sulfuric acid were used to digest， and then titration method was used to determine the content of As2S2 in compound Huanglian Ointment. Results The content of the soluble As in compound Huanglian Ointment was no higher than 15.6 μg/g. The content of As2S2 in compound Huanglian Ointment was no less than 2.21 mg/g. Conclusion The method is simple and easy， which can be applied as the quantity control method of compound Huanglian Ointment.
Keywords： compound Huanglian Ointment； realgar； As2O3； As2S2
复方黄连膏是首都医科大学附属北京中医医院的院内制剂(京药制字Z20053395)，具有清热止痒、解毒消肿止痛的功效，用于湿毒蕴结、瘀血留滞证，证见局部红肿瘙痒或热痛，皮损潮红灼热、瘙痒，舌红，苔黄，脉数，及脓疱病、湿疹、丹毒见上述证候。复方黄连膏由黄连、醋炙乳香、醋炙没药、雄黄、冰片等11味药组成。方中雄黄是国务院《医疗用毒性药品管理办法》中规定的28种毒性中药之一，具有明显的肝、肾毒性；研究表明，无机砷可诱发人类癌症，对人体有危害[1-2]。为此，本研究对雄黄进行质量控制，采用滴定法对主要成分二硫化二砷进行含量测定，采用古蔡氏法对毒性成分三氧化二砷进行限度检查，为临床安全用药提供依据。
1 仪器与试药
分析天平(PB 203-N，METTLER TOLEDO)，超声波清洗器(SK7210HP，上海科导超声仪器有限公司)，水浴锅(SYQ-4，常州朗越仪器制造有限公司)，电子调温电热套(DZTW，北京中仪泓瑞科技发展有限公司)。
复方黄连膏(批号120140911、20140922、20141029)，首都医科大学附属北京中医医院；雄黄，北京同仁堂，按2015年版《中华人民共和国药典》(一部)方法测定，其中二硫化二砷含量为91.66%；0.050 30 mol/L碘液、0.25 mol/L硫酸，北京世纪科博有限公司，容量分析；其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 可溶性砷检查
2.1.1 标准砷溶液的制备
称取三氧化二砷0.132 g，置1000 mL量瓶中，加20%氢氧化钠溶液5 mL溶解，用适量稀硫酸中和，再加稀硫酸10 mL，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。
临用前，精密量取贮备液10 mL，置1000 mL量瓶中，加稀硫酸10 mL，用水稀释至刻度，摇匀，即得(每1 mL相当于1 μg砷)。
2.1.2 标准砷斑的制备
采用古蔡氏法[3]。分別精密量取标准砷溶液2 mL，置砷斑装置的磨口锥形瓶中，加盐酸5 mL、水21 mL，再加入碘化钾试液5 mL与酸性氯化亚锡试液5滴，室温放置10 min后，加锌粒2 g，立即将装有醋酸铅棉花60 mg的导气管(旋塞的顶端平面上放1片溴化汞试纸)密塞于磨口锥形瓶上，并将其置于25～40 ℃水浴中反应45 min，取出溴化汞试纸，即得标准砷斑。
2.1.3 供试品的制备
取复方黄连膏3.20 g，共3批，精密称定，加稀盐酸20 mL，40 ℃水浴保温2 h，再振摇10 min，超声处理(350 W，53 kHz)30 min，过滤(取稀盐酸适量湿润定量滤纸)，残渣用稀盐酸洗涤2次，每次10 mL，搅拌10 min，洗液与滤液合并，置50 mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
2.1.4 供试品测定
精密量取供试品溶液2 mL，按“2.1.2”项下方法制备并测定，结果3批复方黄连膏所显砷斑颜色均不深于标准砷斑，表明每1 g复方黄连膏中可溶性砷含量不高于15.6 μg。
2.2 二硫化二砷含量测定
2.2.1 供试品制备方法考察
2.2.1.1 去除软膏基质的溶剂选择
复方黄连膏的主要基质为凡士林，根据其溶解特性，选择石油醚(60～90 ℃)作为溶解基质的溶剂。取复方黄连膏约10 g，共2份，精密称定，置于离心管中，加石油醚30 mL，60 ℃水浴加热15 min，3000 r/min离心5 min，快速弃去上清液，底部剩余部分重复上述操作2次。最终残渣用少量石油醚洗涤并转移至锥形瓶中，水浴加热挥尽石油醚，放冷，加硫酸钾2.0 g、硫酸铵5.0 g、硫酸30 mL[4-6]，电热套中加热至溶液澄明，放冷，缓缓加水100 mL，加热微沸5 min，放冷。加酚酞指示剂4滴，用氢氧化钠溶液(40→100)中和至微显红色后放冷，用0.25 mol/L硫酸溶液中和至褪色，加碳酸氢钠5 g，摇匀后用0.05 mol/L碘液滴定，临近终点时，加淀粉指示液3 mL，滴定至溶液显棕褐色。每1 mL碘液相当于5.348 mg二硫化二砷。经计算，二硫化二砷的平均转移率为76.29%，接近理论推算值，表明方法可行。, http://www.100md.com(曾祖平 李彧 谭征 韩旭阳 彭冰 王宏 何薇)
关键词：复方黄连膏；雄黄；三氧化二砷；二硫化二砷
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2018.03.015
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2018)03-0068-04
Abstract： Objective To control the quality of realgar in compound Huanglian Ointment. Methods As2O3 which is the toxic component of realgar was carried limit test by Gutzeit's test； Potassium sulfate， ammonium sulfate and sulfuric acid were used to digest， and then titration method was used to determine the content of As2S2 in compound Huanglian Ointment. Results The content of the soluble As in compound Huanglian Ointment was no higher than 15.6 μg/g. The content of As2S2 in compound Huanglian Ointment was no less than 2.21 mg/g. Conclusion The method is simple and easy， which can be applied as the quantity control method of compound Huanglian Ointment.
Keywords： compound Huanglian Ointment； realgar； As2O3； As2S2
复方黄连膏是首都医科大学附属北京中医医院的院内制剂(京药制字Z20053395)，具有清热止痒、解毒消肿止痛的功效，用于湿毒蕴结、瘀血留滞证，证见局部红肿瘙痒或热痛，皮损潮红灼热、瘙痒，舌红，苔黄，脉数，及脓疱病、湿疹、丹毒见上述证候。复方黄连膏由黄连、醋炙乳香、醋炙没药、雄黄、冰片等11味药组成。方中雄黄是国务院《医疗用毒性药品管理办法》中规定的28种毒性中药之一，具有明显的肝、肾毒性；研究表明，无机砷可诱发人类癌症，对人体有危害[1-2]。为此，本研究对雄黄进行质量控制，采用滴定法对主要成分二硫化二砷进行含量测定，采用古蔡氏法对毒性成分三氧化二砷进行限度检查，为临床安全用药提供依据。
1 仪器与试药
分析天平(PB 203-N，METTLER TOLEDO)，超声波清洗器(SK7210HP，上海科导超声仪器有限公司)，水浴锅(SYQ-4，常州朗越仪器制造有限公司)，电子调温电热套(DZTW，北京中仪泓瑞科技发展有限公司)。
复方黄连膏(批号120140911、20140922、20141029)，首都医科大学附属北京中医医院；雄黄，北京同仁堂，按2015年版《中华人民共和国药典》(一部)方法测定，其中二硫化二砷含量为91.66%；0.050 30 mol/L碘液、0.25 mol/L硫酸，北京世纪科博有限公司，容量分析；其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 可溶性砷检查
2.1.1 标准砷溶液的制备
称取三氧化二砷0.132 g，置1000 mL量瓶中，加20%氢氧化钠溶液5 mL溶解，用适量稀硫酸中和，再加稀硫酸10 mL，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。
临用前，精密量取贮备液10 mL，置1000 mL量瓶中，加稀硫酸10 mL，用水稀释至刻度，摇匀，即得(每1 mL相当于1 μg砷)。
2.1.2 标准砷斑的制备
采用古蔡氏法[3]。分別精密量取标准砷溶液2 mL，置砷斑装置的磨口锥形瓶中，加盐酸5 mL、水21 mL，再加入碘化钾试液5 mL与酸性氯化亚锡试液5滴，室温放置10 min后，加锌粒2 g，立即将装有醋酸铅棉花60 mg的导气管(旋塞的顶端平面上放1片溴化汞试纸)密塞于磨口锥形瓶上，并将其置于25～40 ℃水浴中反应45 min，取出溴化汞试纸，即得标准砷斑。
2.1.3 供试品的制备
取复方黄连膏3.20 g，共3批，精密称定，加稀盐酸20 mL，40 ℃水浴保温2 h，再振摇10 min，超声处理(350 W，53 kHz)30 min，过滤(取稀盐酸适量湿润定量滤纸)，残渣用稀盐酸洗涤2次，每次10 mL，搅拌10 min，洗液与滤液合并，置50 mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
2.1.4 供试品测定
精密量取供试品溶液2 mL，按“2.1.2”项下方法制备并测定，结果3批复方黄连膏所显砷斑颜色均不深于标准砷斑，表明每1 g复方黄连膏中可溶性砷含量不高于15.6 μg。
2.2 二硫化二砷含量测定
2.2.1 供试品制备方法考察
2.2.1.1 去除软膏基质的溶剂选择
复方黄连膏的主要基质为凡士林，根据其溶解特性，选择石油醚(60～90 ℃)作为溶解基质的溶剂。取复方黄连膏约10 g，共2份，精密称定，置于离心管中，加石油醚30 mL，60 ℃水浴加热15 min，3000 r/min离心5 min，快速弃去上清液，底部剩余部分重复上述操作2次。最终残渣用少量石油醚洗涤并转移至锥形瓶中，水浴加热挥尽石油醚，放冷，加硫酸钾2.0 g、硫酸铵5.0 g、硫酸30 mL[4-6]，电热套中加热至溶液澄明，放冷，缓缓加水100 mL，加热微沸5 min，放冷。加酚酞指示剂4滴，用氢氧化钠溶液(40→100)中和至微显红色后放冷，用0.25 mol/L硫酸溶液中和至褪色，加碳酸氢钠5 g，摇匀后用0.05 mol/L碘液滴定，临近终点时，加淀粉指示液3 mL，滴定至溶液显棕褐色。每1 mL碘液相当于5.348 mg二硫化二砷。经计算，二硫化二砷的平均转移率为76.29%，接近理论推算值，表明方法可行。, http://www.100md.com(曾祖平 李彧 谭征 韩旭阳 彭冰 王宏 何薇)